同时对多种核酸样本进行测序的方法

摘要

本发明公开了同时对多种核酸样本进行测序的方法，该方法包括：将多种核酸样本分别依次进行接头连接、第一PCR扩增、末端磷酸化和DNA连接；将多种DNA连接产物进行混合；将混合DNA连接产物进行3’末端添加碱基A；将3’末端添加碱基A的连接产物连接测序接头；将测序接头连接产物进行第二PCR扩增，以便获得多种核酸样本的混合测序文库；将混合测序文库进行测序；以及对所述测序结果进行分类，以便分别获得多种核酸样本各自的核酸序列。利用该方法能够同时对多种核酸样本进行测序，并且测序结果准确，可重复性好，成本低，效率高，对测序通量利用充分，该方法尤其适用于血液游离DNA样本。

主权项

一种同时对多种核酸样本进行测序的方法，其特征在于，包括以下步骤：将多种核酸样本分别进行接头连接，以便获得连接接头的核酸样本，其中，针对不同的核酸样本采用不同的接头；将所述连接接头的核酸样本分别进行第一PCR扩增，以便获得多种第一PCR扩增产物；将所述多种第一PCR扩增产物分别进行末端磷酸化，以便获得多种经过末端磷酸化的PCR扩增产物；针对每一种核酸样本，分别将所述经过末端磷酸化的PCR扩增产物进行DNA连接，以便获得多种DNA连接产物；将所述多种DNA连接产物进行混合，以便获得混合DNA连接产物；将所述混合DNA连接产物进行3’末端添加碱基A，以便获得3’末端添加碱基A的连接产物；将所述3’末端添加碱基A的连接产物连接测序接头，以便获得测序接头连接产物；将所述测序接头连接产物进行第二PCR扩增，以便获得第二PCR扩增产物，所述第二PCR扩增产物构成所述多种核酸样本的混合测序文库；将所述混合测序文库进行测序，以便获得测序结果；以及基于所述测序结果中与所述接头相对应的序列，对所述测序结果进行分类，以便分别获得所述多种核酸样本各自的核酸序列。