发明名称 |
一种重组Taq DNA聚合酶及其制备方法 |
摘要 |
本发明涉及基因工程技术领域,具体是一种制备水生栖热菌(Thermusaquaticus)TaqDNA聚合酶基因重组表达酶的方法。该基因核苷酸序列及编码蛋白质的氨基酸序列分别为SEQIDNO:1和SEQIDNO:2。本发明通过基因克隆技术克隆出基因序列,构建原核表达载体,利用已构建的TaqDNA聚合酶基因的重组菌株,利用LB培养液进行悬浮,37℃培养4.5小时后,加入终浓度为0.5mM的IPTG诱导16-20小时,离心收集菌体后使用2-4mg/ml溶菌酶解离得到蛋白液,通过层析柱和透析袋过滤,得到高纯度活性蛋白TaqDNA聚合酶。与现有技术相比,本发明生产工艺稳定性好,得到的TaqDNA聚合酶活力高,可有效地保证产品产量和纯度,用于基因PCR扩增效果良好。 |
申请公布号 |
CN103602643A |
申请公布日期 |
2014.02.26 |
申请号 |
CN201310576003.5 |
申请日期 |
2013.11.18 |
申请人 |
青岛思能基因生物技术有限公司 |
发明人 |
刘涛;马秀芬 |
分类号 |
C12N9/12(2006.01)I;C12N15/54(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12R1/01(2006.01)N |
主分类号 |
C12N9/12(2006.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
一种重组Taq DNA聚合酶,其特征在于,其蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。 |
地址 |
266003 山东省青岛市市南区红岛路8号学术交流中心二楼青岛思能基因生物技术有限公司 |