亨廷顿蛋白的糖基化修饰方法

摘要

本发明公开了一种亨廷顿蛋白的糖基化修饰方法，包括以下步骤：（1）获取重组蛋白Htt（1-90）：a.亨廷顿蛋白基因的获得；b.重组表达质粒pTWIN1-htt的构建；c.表达亨廷顿蛋白的重组大肠杆菌菌株DH5α-htt的构建；d.重组蛋白的表达；（2）重组蛋白Htt（1-90）的纯化；（3）SPPS方法获得糖基化修饰的Htt（Cys-K92-K158）多肽；（4）Htt（Cys-K92-K158）多肽的纯化；（5）Htt（Cys-K92-K158）多肽与重组蛋白Htt（1-90）经过偶联获得经糖基化修饰目的蛋白Htt（1-158）；（6）经糖基化修饰目的蛋白Htt（1-158）的纯化。通过对亨廷顿蛋白的糖基化修饰，显示出糖基化蛋白有较强的稳定性，且温度和时间对亨廷顿蛋白的吸收峰的影响，说明经糖基化修饰的亨廷顿蛋白相对稳定。

主权项

一种亨廷顿蛋白的糖基化修饰方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）、获取重组蛋白Htt（1‑90）：a、亨廷顿蛋白基因的获得；b、重组表达质粒pTWIN1‑htt的构建；c、表达亨廷顿蛋白的重组大肠杆菌菌株DH5α‑htt的构建；d、重组蛋白的表达；（2）、重组蛋白Htt（1‑90）的纯化；（3）、SPPS方法获得糖基化修饰的Htt（Cys‑K92‑K158）多肽；（4）Htt（Cys‑K92‑K158）多肽的纯化；（5）Htt（Cys‑K92‑K158）多肽与重组蛋白Htt（1‑90）经过偶联获得经糖基化修饰目的蛋白Htt（1‑158）；（6）经糖基化修饰目的蛋白Htt（1‑158）的纯化。