治疗梅毒感染的中药组合物的检测方法

摘要

本发明公开了一种治疗梅毒感染的药物组合物的质量控制方法。本发明的药物组合物原料药组成为：大黄、白花蛇舌草、陈皮、木鳖子、白芷、知母、金银花、黄柏、乳香、当归、赤芍、甘草、黄药子、大蓟、蜈蚣、白僵蚕、蛇蜕组成；本发明对大黄、黄柏、赤芍、白芷进行定性鉴别，采用高效液相色谱法对大黄素进行含量测定。

主权项

1.一种治疗梅毒感染的中药组合物的检测方法，其特征在于该方法包括如下步骤：选取如下原料药：检测方法包括如下鉴别和含量测定：鉴别：(1)取本发明药物组相当于原料药15g，加氯仿20-30ml，盐酸0.5-2ml，置水浴上加热回流20-40分钟，放冷，滤过，滤液置水浴上浓缩至约1ml，作为供试品溶液；另取大黄对照药材1g，加氯仿5-15ml，盐酸0.5-2ml，同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以30～60℃的石油醚-甲酸乙酯-甲酸以10-20∶3-10∶0.5-2的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(2)取本发明药物组相当于原料药3g，加甲醇3-10ml，超声处理3-10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取黄柏对照药材1g，加甲醇5-15ml，同法制成对照药材溶液；再取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水以5-10∶0.5-2∶1-3为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的一个黄色荧光斑点；(3)取本发明药物组相当于原料药15g，加水20-40ml，振摇1-3分钟，抽滤，滤液用60～90°C的石油醚萃取两次，每次20-40ml，弃去石油醚层，水层用醋酸乙酯萃取1-3次，每次20-40ml，合并醋酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇2ml溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇，制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取供试品液2μl、对照品液1μl，点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇-水以25-35∶15-20∶3-10的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％的香草醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的深蓝色斑点；(4)取本发明药物组相当于原料药15g,加60～90°C的石油醚20-40ml,超声处理5-15分钟，过滤，滤液挥至1.5ml,作为供试品溶液，另取白芷对照药材0.1g，加60～90°C的石油醚1ml，浸渍1小时，上清夜作为对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5μl，点于同一硅胶GF254板上，以60～90°C的石油醚-乙醚以2-5∶2-5为展开剂，展开，取出，凉干，置紫外灯365nm和254nm下观察，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的颜色的荧光斑点；含量测定：照中国药典2005年版一部附录VI D高效液相色谱法测定色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.1％磷酸溶液以70-90∶10-30为流动相；检测波长为254nm；理论板数按大黄素峰计算应不低于1500；对照品溶液的制备取大黄素对照品适量，精密称定，加稀乙醇制成每1ml含0.012mg的溶液，作为对照品溶液；供试品溶液的制备取本发明药物组相当于原料药3g,置圆底烧瓶中，精密加入甲醇40-60ml，称定重量，加热回流20-40min，放冷，补重，滤过，取续滤液20-30ml，蒸干，加2.5mol/1H₂SO₄40-60ml,氯仿15-25ml回流0.5-2小时，冷却，移至分液漏斗，分取氯仿层，酸液用氯仿提取1-3次，每次15-25ml，合并氯仿液，以无水硫酸钠脱水，氯仿液合并，蒸干，残渣加甲醇定容至10ml；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本发明药物组每10g原料药含大黄以大黄素(C₂₁H₁₈O₁₁)计，不得少于0.31mg。