尼卡巴嗪半抗原和人工抗原的制备

摘要

本发明公开了一种尼卡巴嗪的人工抗原制备方法，属于生物化工技术领域。本发明以4-硝基苯胺、草酰氯为主要原料，合成一种尼卡巴嗪半抗原；用碳二亚胺法将其与载体蛋白人血清白蛋白（HSA）偶联制备偶联物，用紫外分光光度法测定偶联物的偶联比。试验结果表明我们制得偶联物产生了针对尼卡巴嗪很好的抗体，即是尼卡巴嗪人工抗原。本发明成功合成了尼卡巴嗪人工抗原，步骤简洁合理，效果理想。本发明所制备的尼卡巴嗪人工抗原适合用于尼卡巴嗪残留的酶联免疫分析。

主权项

尼卡巴嗪半抗原的制备1）4‑硝基苯胺（0.1g, 0.724 mmol）溶于5ml四氢呋喃中；加入（0.18 g，1.448 mmol）草酰氯，20 uL 2,6‑二甲基吡啶催化反应，60度反应3 h；2）反应完后，立即冷却到25度，加20ml水淬灭反应；加入100 ml乙酸乙酯萃取，分出有机相，再用100 ml乙酸乙酯萃取一次，合并有机相，干燥浓缩，TLC分离纯化，展开剂氯仿/乙酸乙酯/甲醇/甲酸86:10:4:1；DMF洗脱，氮气吹干，减压干燥，得到尼卡巴嗪半抗原。