一种胎盘造血干细胞及其制备方法和胎盘造血干细胞注射剂

摘要

本发明涉及生物技术领域，公开了一种胎盘造血干细胞及其制备方法和胎盘造血干细胞注射剂。该制备方法将胎盘预处理后，用Ⅳ型胶原酶消化液和Ⅱ型胶原酶消化液消化，然后洗涤、过滤，分别收集第一滤液和第一滤渣；将所述第一滤渣用Ⅰ型胶原酶消化液和步骤1所述Ⅱ型胶原酶消化液消化，然后洗涤、过滤，收集第二滤液；合并两次滤液并离心，弃上清后重悬沉淀，将重悬液加至人淋巴细胞分离液中，然后密度梯度离心，收集中间一层的白膜层细胞液并离心，弃上清后即得胎盘造血干细胞。本发明采用Ⅳ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶联合、Ⅰ型胶原酶和Ⅱ型胶原酶联合，利用不同胶原酶的特性充分消化胎盘制备造血干细胞，提高了所制备的造血干细胞的数量和活力。

主权项

一种胎盘造血干细胞的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、将胎盘预处理后，用Ⅳ型胶原酶消化液和Ⅱ型胶原酶消化液消化，然后洗涤、过滤，分别收集第一滤液和第一滤渣，所述Ⅳ型胶原酶消化液中Ⅳ型胶原酶质量百分比为0.02‑0.2%，所述Ⅱ型胶原酶消化液中Ⅱ型胶原酶质量百分比为0.01‑0.1%；步骤2、将所述第一滤渣用Ⅰ型胶原酶消化液和步骤1所述Ⅱ型胶原酶消化液消化，然后洗涤、过滤，分别收集第二滤液和第二滤渣，所述Ⅰ型胶原酶消化液中Ⅰ型胶原酶质量百分比为0.02‑0.2%；步骤3、合并第一滤液和第二滤液并离心，弃上清后重悬沉淀，将得到的重悬液加至人淋巴细胞分离液中，然后密度梯度离心，收集中间一层的白膜层细胞液并离心，弃上清后即得胎盘造血干细胞。