用于蛋白质的质谱分析法的定量标准

摘要

本发明涉及测定样品中靶多肽的绝对量的方法，该方法包括以下步骤：（a）向该样品中加入（aa）融合多肽，该融合多肽包含（i）至少一个标签(tag)序列和（ii）靶多肽的子序列；并向该样品中加入（ab）已知绝对量的标签多肽，所述标签多肽包含根据（aa）的标签序列或由根据（aa）的标签序列组成，其中所述融合多肽（作为一方），与所述靶多肽和所述标签多肽（作为另一方）相比，是质量改变的，例如，融合多肽（作为一方）与所述靶多肽和所述标签多肽（作为另一方）相比是不同同位素标记的；（b）对步骤（a）中获得的混合物进行蛋白水解消化；（c）对步骤（b）的蛋白水解消化的产物，可选地在层析之后，进行质谱分析；及（d）从(i)步骤（c）获得的质谱中所述融合多肽、所述标签多肽和所述靶多肽的峰强度及（ii）所述标签多肽的该已知绝对量，确定所述靶多肽的绝对量。

主权项

确定样品中靶多肽的绝对量的方法，所述方法包括以下步骤：（a）向所述样品中加入：（aa）融合多肽，所述融合多肽包含（i）至少一个标签序列和（ii）靶多肽的子序列；和（ab）已知绝对量的标签多肽，所述标签多肽包含根据（aa）的所述标签序列或由根据（aa）的所述标签序列组成；其中所述融合多肽作为一方，与所述靶多肽和所述标签多肽作为另一方相比，质量改变，例如，所述融合多肽一方与所述靶多肽及所述标签多肽另一方是不同同位素标记的；（b）进行步骤（a）中获得的混合物的蛋白水解消化；（c）对步骤（b）的蛋白水解消化的产物，可选地在层析之后，进行质谱分析；和（d）从(i)步骤（c）中获取的质谱中所述融合多肽、所述标签多肽和所述靶多肽的峰强度及（ii）所述标签多肽的所述已知绝对量，确定所述靶多肽的绝对量。