一种碱性普鲁兰酶的制备方法及应用

摘要

本发明公开了一种碱性普鲁兰酶的制备方法及应用。本发明以好热地芽孢杆菌Geobacillus kaustophilus MCCC1A02570的基因组DNA为模板，设计并合成引物，通过PCR扩增普鲁兰酶基因,将该基因克隆入pET-22b表达载体上，在大肠杆菌E.coli BL21中进行诱导表达，采用Ni-Sepharose亲和层析纯化得到高纯度的重组普鲁兰酶蛋白。该酶的最适温度为70℃，最适pH为8.0，在碱性条件下具有较高的活性和良好的耐热性。该酶的最适底物为普鲁兰糖，并且其水解支链淀粉和糯米淀粉的能力明显高于直链淀粉，显示其具有较好的水解支链的能力。该酶在生产高麦芽糖浆和高葡萄糖浆以及在洗涤剂工业中有潜在的应用前景。

主权项

一种表达普鲁兰酶的核苷酸序列，其特征在于：其核苷酸序列如SEQ ID NO1所示。