一种提高猪体细胞核移植效率的方法

摘要

本发明公开了一种提高猪体细胞核移植效率的方法，包括以下步骤：S1、选择和培养卵母细胞；S2、分离和培养供体细胞；S3、采用盲吸法去除成熟卵母细胞核及第一极体，注入一个供体细胞于卵周隙中；电融合重构胚并激活重构胚；S4、将重构胚置于含有浓度为100-200μM的RG108和浓度为100-500nM的Scriptaid的PZM-3培养液中培养14-16小时，再将重构胚置于PZM-3培养液中培养；本发明能显著提高猪克隆早期胚胎的发育囊胚率和囊胚质量；同时调节存在紧密联系和协同作用的基因甲基化和乙酰化两大表观遗传修饰，比单独用Scriptaid处理的效果更好，能调节胚胎早期基因表达趋于正常，最终提高猪体细胞核移植效率。

主权项

一种提高猪体细胞核移植效率的方法，其特征在于包括以下步骤：S1、选择和培养猪卵母细胞；S2、分离和培养供体细胞；S3、采用盲吸法去除成熟卵母细胞核及第一极体，注入一个供体细胞于卵周隙中；电融合重构胚并激活重构胚；S4、将重构胚置于含有浓度100‑200μM的RG108和浓度100‑500nM的Scriptaid的PZM‑3培养液中培养14‑16小时，再将重构胚置于PZM‑3培养液中培养；在S2步骤中选取猪耳皮成纤维细胞作为供体细胞。