发明名称 巨大芽孢杆菌硝酸盐还原酶催化-电子转移亚基共表达载体
摘要 一种基因工程技术领域的巨大芽孢杆菌硝酸盐还原酶催化-电子转移亚基共表达载体,首先测定巨大芽孢杆菌全基因组序列作为模板,根据设计出的PCR引物扩增出含有酶切位点硝酸盐还原酶催化亚基(Bm-Nas B)和电子转移亚基(Bm-Nas C)的基因序列,并依次连接到共表达载体pETDuet-1上,通过菌落PCR技术挑选含有目的基因片段的大肠杆菌DH5α的阳性克隆。本发明克服现有技术中由于硝酸盐还原酶电子转移亚基基因序列在天然的巨大芽孢杆菌中表达量非常低,严重限制使用效果,实现极大的提高该基因的表达量。
申请公布号 CN103571866A 申请公布日期 2014.02.12
申请号 CN201310566278.0 申请日期 2013.11.13
申请人 上海交通大学 发明人 周培;冯海玮;支月娥;孙玉静;陆伟;刘群录;卫星;时唯伟;初少华
分类号 C12N15/70(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;B09C1/10(2006.01)I;C12R1/11(2006.01)N 主分类号 C12N15/70(2006.01)I
代理机构 上海交达专利事务所 31201 代理人 王毓理;王锡麟
主权项 一种巨大芽孢杆菌硝酸盐还原酶共表达载体,其特征在于,其核苷酸序列由硝酸盐还原酶催化亚基Bm‑Nas B,如Seq ID No.1所示,以及硝酸盐还原酶电子转移亚基Bm‑Nas C,如Seq ID No.2所示组成。
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