一种基于低pH值毛细管区带电泳的复合物收集方法

摘要

本发明涉及一种基于低pH值毛细管区带电泳的复合物收集方法，属于生物分离分析技术领域。该方法如下：将蛋白质与荧光标记ssDNA库混合后在冰上孵育；用低pH值毛细管区带电泳对孵育后的混合样品分离，电泳运行缓冲液pH值＜3；电泳分离时，混合样品中游离蛋白质、游离ssDNA和蛋白质与ssDNA形成的复合物据所带电荷性质分别向与其电荷性质相反方向移动；对在毛细管出、入口端收集的收集物进行CE-LIF分析，验证所述方法可行。所述方法可抑制电渗流、抑制带正电荷样品和碱性蛋白质在毛细管内壁的吸附；实现不同电荷类型样品的在线分离；增加进样量可增大样品在线富集量，单次分析收集得到较多的蛋白质与ssDNA复合物。

主权项

一种基于低pH值毛细管区带电泳的复合物收集方法，其特征在于：所述方法步骤如下：（1）蛋白质与荧光标记ssDNA库混合得到混合样品，在冰上孵育；（2）采用低pH值毛细管区带电泳，经压力进样，对孵育后的混合样品进行电泳分离，其中，毛细管区带电泳运行缓冲液的pH值＜3；混合样品中含有游离蛋白质、游离ssDNA和蛋白质与ssDNA形成的复合物，电泳分离过程中，所述游离蛋白质、游离ssDNA和蛋白质与ssDNA形成的复合物根据自身所带电荷的性质分别向与其电荷性质相反的电极方向移动，在毛细管的出、入口端对分离后的样品进行收集；（3）对在毛细管出、入口端收集到的收集物进行毛细管电泳‑激光诱导荧光分析，采用压力进样，验证所述基于低pH值毛细管区带电泳的复合物收集方法可行。