放线菌素D新同系物2-甲基-放线菌素D的制备方法

摘要

本发明公开了放线菌素D新同系物2-甲基-放线菌素D的制备方法，经核磁与质谱综合解析，确定了该化合物的结构，其化学结构为：为放线菌素D的新同系物。其制法是用累西菲链霉菌Streptomyces recifensis CGMCC No.5228作生产菌。该链霉菌在含有可溶性淀粉的液体培养基中发酵，获得菌丝体、发酵上清液和各种代谢产物。对发酵后的发酵上清液和菌丝体用氯仿或乙酸乙酯萃取，通过提取分离和纯化等方法，得到结构如上的新化合物，通过细胞测定表明该化合物具有抗肿瘤细胞活性。本发明为研制新的抗肿瘤药物提供先导化合物，对开发利用我国的药用放线菌资源具有重要价值。

主权项

放线菌素D新同系物2‑甲基‑放线菌素D的制备方法，其特征在于所述制备方法的具体步骤如下：(1)菌株发酵：发酵菌株为累西菲链霉菌Streptomyces recifensis CGMCC No.5228，该菌在培养基成分为酵母浸膏4.0±1g，麦芽浸膏5.0±1g，葡萄糖4.0±1g，MgSO40.1±0.05g，蒸馏水0.8～1.5L的种子培养基中振荡培养60h～80h；然后接种于发酵罐中，发酵培养基为溶性淀粉5.0g±1，葡萄糖10.0±2g，蛋白胨5.0±1g，酵母浸膏5.0±1g，NaCl4.0±2g，K2HPO40.5±0.1g，MgSO40.5±0.1g，CaCO32.0±0.5g，蒸馏水0.8～1.5L，pH＝7.2；28±2℃振荡培养100±5h；(2)发酵100±5h后，获得含发酵产物的发酵液，发酵液经浓缩后用氯仿或乙酸乙酯萃取，萃取物通过硅胶柱氯仿：甲醇＝100：0～0：100梯度的层析、凝胶氯仿：甲醇＝5：4的层析以及液相色谱甲醇：水：乙腈＝26：46：28的纯化，得到成品。