金银花种苗的快速繁殖和离体保存方法

摘要

本发明提供金银花种苗的快速繁殖和离体保存方法，包括无菌无性系的建立，快速繁殖，生根培养，试管苗的假植与移栽，离体保存步骤。金银花具有较高的保健、观赏、药用及生态功能，为我国特有的名贵中药材之一，数有中药之中“青霉素”的美誉。本发明提供了金银花组培中存在问题的解决方案和最佳培养技术。本发明的方法增殖速度达1:4-6，移栽成活率达90%以上，用多效唑（PP333）与吲哚丁酸（IBA）配合使用得到了99%的生根效果，得到的芽生成的试管苗遗传性稳定，用此方法建立的金银花无菌无性系在培养过程几乎无污染发生，且外植体在培养基上很快恢复生长，为大规模工厂化生产金银花优质种苗提供了技术支撑。

主权项

金银花种苗的快速繁殖和离体保存方法，包括无菌无性系的建立，快速繁殖，生根培养，试管苗的假植与移栽，离体保存步骤，所述无菌无性系的建立是取金银花芽条或幼茎，先用70%乙醇消毒20s，再用0.1%升汞水溶液灭菌6min,用无菌水冲洗干净，接入培养基中进行快速繁殖，即将幼茎消毒后，去掉叶片，切段，放在培养基①上培养25d，取下茎段上所发出的芽在培养基②上培养60d，继代周期为30d继代1次，再在培养基③上经过30d的培养；所述生根培养是在培养基③上培养，3‑4丛芽/瓶接种30d后，选取芽条高度在3cm以上的，截取下来放在培养基④上培养14d‑17d开始生根；所述试管苗的假植与移栽是在移栽过渡前，挑出生根培养20d的试管瓶苗，先放在简易荫棚内，10d后移入栽苗基质中，在刚移苗1‑2周内,用塑料布盖在移出苗的上面保湿，待苗长出新根或新叶后去掉塑料布，培育30d后移入大田，所述离体保存是用试管生根苗的培养物类型进行离体保存。