饮用水中大肠杆菌的检测方法

摘要

检测饮用水中大肠杆菌的方法，所述方法将大肠杆菌菌悬液用缓冲液配成不同浓度梯度，然后进行半乳糖苷酶的诱导，终止反应5min，3000r/min离心5min，收集大肠杆菌，加入LPB制成悬浮液作为待测液，将待测液加入96孔酶板中，再加入等量上述CPRG溶液，混合均匀于室温下反应，3h后出现显色反应，滴加两滴待测液至试纸条上，将试纸条置于测试孔检测后记录光电传感器显示的吸光强度值，配制细菌群落数梯度浓度的大肠杆菌溶液，平行重复在光电型传感器上进行检测，记录光反射信号值并计算用光电传感法测得的大肠杆菌浓度。本饮用水中大肠杆菌的检测方法具有该方法相比常规DNA提取方法更加快速、简便，并且效果良好。

主权项

饮用水中大肠杆菌的检测方法，其特征在于，所述方法将大肠杆菌菌悬液用0.02mol/L pH=6缓冲液配成不同浓度梯度，分别为103‑107CFU/mL，然后进行半乳糖苷酶的诱导，首先取10mL肉汁制作的菌悬液，加入300μL浓度为10mmol/L的IPTG溶液，36.5℃水浴培养30min诱导β‑半乳糖苷酶，然后终止反应5min，3000r/min离心5min，收集大肠杆菌，加入100μLPB制成悬浮液作为待测液，将100μL待测液加入96孔酶板中，再加入等量上述CPRG溶液，混合均匀于室温下反应，3h后出现显色反应，滴加两滴待测液至试纸条上，将试纸条置于测试孔检测后记录光电传感器显示的吸光强度值，根据不同浓度大肠杆菌标准液所对应的不同光反射强度值，建立标准曲线；配制细菌群落数梯度浓度的大肠杆菌溶液，平行重复在光电型传感器上进行检测，记录光反射信号值并计算用光电传感法测得的大肠杆菌浓度。