一种利用海洋胶原蛋白酶MCP-01制备胶原蛋白小肽的方法

摘要

本发明涉及一种利用海洋胶原蛋白酶MCP-01制备胶原蛋白小肽的方法，包括如下步骤：（1）将海洋胶原蛋白酶MCP-01溶于Tris-HCl缓冲液中，配成酶浓度为0.3～0.5mg/mL的酶液；（2）将牛肌腱I型不可溶胶原蛋白加入酶液中，在水浴锅中反应，在4℃条件下，离心后超滤，制得胶原蛋白小肽。本发明根据海洋细菌胶原蛋白酶MCP-01催化结构域的特点，设计最佳降解条件，使海洋胶原蛋白酶MCP-01高效降解胶原蛋白，产生的胶原蛋白小肽分子量小于1000Da的肽段占85%以上，从而使其降解产物在医药、食品、化妆品等高附加值领域中具有巨大的应用潜力。

主权项

一种利用海洋胶原蛋白酶MCP‑01制备胶原蛋白小肽的方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）将海洋胶原蛋白酶MCP‑01溶于Tris‑HCl缓冲液中，海洋胶原蛋白酶MCP‑01的表达基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，配成酶浓度为0.3～0.5mg/mL的酶液；（2）按照重量体积比为18～22:1的比例将牛肌腱I型不可溶胶原蛋白加入酶液中，单位mg/ml，在45～50℃的水浴锅中反应24～26小时，在4℃条件下，13000转/分钟离心10～15min，制得胶原蛋白肽；（3）上述胶原蛋白肽经过截留量为3000Da的超滤管超滤离心，收集下层滤过物，即制得胶原蛋白小肽。