基于微观动态离子流技术检测水稻真菌性立枯病的方法

摘要

本发明提供了一种基于微观动态离子流检测技术的水稻真菌性立枯病的检测方法，其是利用微观动态离子流检测技术分别检测水稻根系K+、NH4+和Ca2+的吸收能力，检测出感染真菌性立枯病的水稻。本发明利用微观动态离子流检测技术可测得真菌性立枯病发病时的离子流信息，通过与正常生长的水稻比较，获得真菌性立枯病发病时的离子流吸收或释放规律，利用此规律评价真菌性立枯病的发生，从而实现对水稻真菌性立枯病的快速、无损检测，检测后的植株材料还能够正常生长，避免了珍贵水稻苗的损失，检测结果对比明显，方法可靠，为水稻育苗和水稻育种提供了一种快速、无损的检测水稻真菌性立枯病的新方法。

主权项

一种基于微观动态离子流检测技术检测水稻真菌性立枯病的方法，其特征在于，利用微观动态离子流检测技术分别检测水稻根系K+、NH4+和Ca2+的吸收能力，检测出感染真菌性立枯病的水稻，所述离子流流向处于外流或者是内流幅度较对照变小即为感染真菌性立枯病；包括以下步骤：（1）向微电极中灌入离子灌充液至充满所述电极尖端1cm，再将微电极前端吸入相应的测试离子交换剂；（2）将经过步骤（1）处理后的微电极套入已氯化的Ag/AgCl微电极线基座，并放入校正液中校正；（3）取待测水稻苗，将其根部先放在测试缓冲液中平衡30min，再用校正后的微电极对待测水稻苗进行检测10～15min；（4）对检测结果进行处理和分析；其中，步骤（1）所述离子灌充液为：80～140mM KCl、80～140mMNH4Cl和80～140mM CaCl2；步骤（1）电极的前端吸入的测试离子交换剂的长度为：K+100～200μm；NH4+20～50μm和Ca2+15～30μm；步骤（2）所述的校正液为：K+：0.05～0.15mM KCl和0.5～1.5mMKCl；NH4+：0.05～0.15mM NH4Cl和0.5～1.5mM NH4Cl；Ca2+：0.05～0.15mM CaCl2和0.5～1.5mM CaCl2;步骤（3）中用于检测K+或Ca2+的测试缓冲液为：0.05～0.15mMKCl、0.05～0.15mM CaCl2、0.05～0.15mM MgCl2、0.3～0.6mM NaCl、0.1～0.3mM Na2SO4和0.2～0.5mM MES；用于检测NH4+的测试缓冲液为：0.8～1.2mM KCl、0.05～0.15mM CaCl2和0.05～0.15mM NH4Cl。