一种自决明子中分离制备红镰霉素龙胆二糖苷的方法

摘要

本发明公开了一种自决明子中分离制备红镰霉素龙胆二糖苷的方法。其特征在于决明子用乙醇加热回流提取得决明子提取物浸膏；浸膏用甲醇回流提取得甲醇提取物；甲醇提取物采用硅胶干柱色谱法分离得到红镰霉素龙胆二糖苷粗品；粗品采用硅胶干柱色谱法、C18反相色谱柱纯化得到红镰霉素龙胆二糖苷黄色粉末。经高效液相色谱法测定其纯度大于98％。

主权项

一种自决明子中分离制备红镰霉素龙胆二糖苷的方法，其特征在于该方法为：步骤1：取决明子药材，加入按药材质量计6～14倍体积份的20～50％乙醇，加热回流提取0.5～2.5小时，静置，过滤；药渣用同样方法再提取1～3次，合并提取液，60～70℃水浴减压回收溶剂，得决明子提取物浸膏；步骤2：取决明子提取物浸膏，加入按浸膏质量计60～120倍体积份的甲醇，回流提取6～10次，每次提取30～100分钟，过滤，取上清液，回收溶剂得甲醇提取物；步骤3：取甲醇提取物，加入按甲醇提取物质量计5～10倍体积份的甲醇溶解，按甲醇提取物与硅胶质量比1：1～3拌入200～300目的硅胶，自然干燥，得到拌样硅胶，另按甲醇提取物与硅胶质量比1：60～150取200～300目的硅胶，干法装柱，色谱柱径高比1：5～10；将拌样硅胶装于柱顶，以体积比为9：1：0.1～7：3：0.5的氯仿‑甲醇‑水混合溶剂洗脱，下行法进行干柱层析，洗脱1～3倍柱体积，置阴凉避光处挥干展开剂，自柱头而底部平均切割为15～25份，各切割份用甲醇洗脱，甲醇洗脱液用硅胶薄层色谱检识，合并含有红镰霉素龙胆二糖苷的6～10至11～15份甲醇洗脱液，回收溶剂，得红镰霉素龙胆二糖苷粗品；步骤4：取红镰霉素龙胆二糖苷粗品用甲醇溶解，按红镰霉素龙胆二糖苷粗品与硅胶的质量比1：1～3拌入200～300目的硅胶，自然干燥，得到拌样硅胶，另按红镰霉素龙胆二糖苷粗品与硅胶质量比1：50～120取200～300目的硅胶，干法装柱，色谱柱径高比1：5～10；将拌样硅胶加于柱顶，以体积比为9：1：0.1～7：3：0.5的氯仿‑甲醇‑水混合溶剂洗脱，下行法进行干柱层析，分份收集，洗脱液用硅胶薄层色谱检识，合并含有红镰霉素龙胆二糖苷的流份，回收溶剂，得红镰霉素龙胆二糖苷粗品；步骤5：取步骤4中红镰霉素龙胆二糖苷粗品，用按红镰霉素龙胆二糖苷粗品质量计为2～4体积份的20～40％甲醇溶解，采用C18反相色谱柱纯化，径高比1：8～15，以10％～40％甲醇洗脱，采用硅胶薄层色谱检识，合并含有红镰霉素龙胆二糖苷的流份，回收溶剂得黄色粉末，即为红镰霉素龙胆二糖苷。