发明名称 柱状黄杆菌多克隆抗体的制备方法
摘要 一种柱状黄杆菌多克隆抗体的制备方法,属于生物技术领域。本发明目的是利用免疫学原理,提供一种柱状黄杆菌多克隆抗体的制备方法。本发明包括如下步骤:采用甲醛灭活的方法制备病原菌颗粒性抗原;取a作为抗原,与弗氏完全佐剂等体积混合,免疫健康白兔;两周后取a与弗氏不完全佐剂等体积混合,对b中白兔采用同样方法进行二次免疫,采用间接ELISA法监测抗血清效价,并按每隔两周免疫一次的方式进行第三、四次免疫,第四次免疫两周后单独用颗粒性免疫原冲击免疫一次;收集白兔血液,分离抗血清;纯化抗血清,得到目标多克隆抗体,并鉴定其蛋白含量、效价及特异性;步骤a中的病原菌为柱状黄杆菌G4R3,为柱状黄杆菌的代表类群。本发明方法简单、成本低廉,具有特异性高,蛋白含量高、效价高的优点,可用于今后柱状黄杆菌的快速诊断及预防免疫。
申请公布号 CN103524616A 申请公布日期 2014.01.22
申请号 CN201310478221.5 申请日期 2013.10.15
申请人 浙江万里学院 发明人 吕娜;张捷
分类号 C07K16/12(2006.01)I 主分类号 C07K16/12(2006.01)I
代理机构 吉林长春新纪元专利代理有限责任公司 22100 代理人 白冬冬
主权项 一种柱状黄杆菌多克隆抗体的制备方法,其特征在于:包括如下步骤:a、采用甲醛灭活的方法制备病原菌颗粒性抗原;b、取a作为抗原,与弗氏完全佐剂等体积混合,免疫健康白兔;c、两周后取a与弗氏不完全佐剂等体积混合,对b中白兔采用同样方法进行二次免疫,采用间接ELISA法监测抗血清效价,并按每隔两周免疫一次的方式进行第三、四次免疫,第四次免疫两周后单独用颗粒性免疫原冲击免疫一次;d、收集白兔血液,分离抗血清;e、纯化抗血清,得到目标多克隆抗体,并鉴定其蛋白含量、效价及特异性;步骤a中的病原菌为柱状黄杆菌G4R3,为柱状黄杆菌的代表类群。
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