发明名称 一种鉴别杂交黄颡鱼幼鱼性别的方法
摘要 本发明公开了一种杂交黄颡鱼[黄颡鱼(♀)╳瓦氏黄颡鱼(♂)]幼鱼性别鉴定的方法,运用活体性腺压片-醋酸洋红染色-乙醇结晶紫染色的方法,鉴定个体体长规格为3厘米以上杂交黄颡鱼,后经过性腺组织石蜡切片验证了此方法的准确性。此方法同样适用于普通黄颡鱼以及“全雄一号”黄颡鱼幼鱼的性别鉴定。该发明方法完成1尾幼鱼的性别鉴定仅需3分钟,2人配合2小时可以检测100尾幼鱼。本发明具有高效、经济、快速、准确、稳定的特点,在黄颡鱼及其杂交黄颡鱼雄性种苗培育中具有重要的应用价值,可以应用于黄颡鱼商品夏花苗性别的快速鉴定。
申请公布号 CN103529036A 申请公布日期 2014.01.22
申请号 CN201310466149.4 申请日期 2013.10.08
申请人 南京师范大学 发明人 尹绍武;张国松;汪亚媛;王小鲁;胡亚丽
分类号 G01N21/84(2006.01)I;G01N1/30(2006.01)I 主分类号 G01N21/84(2006.01)I
代理机构 南京知识律师事务所 32207 代理人 卢亚丽
主权项 一种鉴别杂交黄颡鱼幼鱼性别的方法,它包括以下步骤:1)染色液冰醋酸洋红溶液配制步骤:称取0.5g洋红染色剂,加入100mL45%的冰醋酸,加热溶解2‑4分钟;待冷却后,过滤取滤液,避光常温保存;2)染色液乙醇结晶紫溶液配制步骤:称取结晶紫染色剂1.0g,草酸铵0.4g,然后再加入20mL95%的乙醇,搅拌溶解,最后加入80mL双蒸水混合均匀,过滤后取其滤液,避光常温保存;2)性腺组织固定步骤:用5%醋酸溶液0.2‑0.4mL固定性腺组织,性腺组织迅速被固定,质地变硬,颜色变为乳白色;4)性腺组织取样步骤:固定后30‑60秒内取出乳白色的性腺组织,放在预先滴有1滴洋红醋酸溶液的载玻片上,再加入1滴结晶紫乙醇溶液让其染色2‑4分钟,最后盖上盖玻片并将性腺组织轻轻压平,放在4×10的生物显微镜下观察;3)压片观察:根据幼鱼性腺形状、细胞排列方式、细胞个体大小等方面的差异鉴别幼鱼的性别;性腺形状呈栉状分支;细胞体积小,细胞紧密堆积在一起,细胞与细胞间隔很难分辨的为雄鱼;性腺形状呈带状细丝;细胞体积相对较大,形状呈圆形或卵圆形,细胞排列规则,轮廓清晰的为雌鱼。
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