一种在贝类幼虫中定量检测甲状腺激素的方法

摘要

本发明涉及生物学领域，具体说是一种简单快速准确的测定贝类中的甲状腺激素含量的方法。该方法包括如下步骤：将幼虫样品用研磨成粉末状；低温干燥，分成AB两部分，将A部分样品准确称量干重后，加入NaOH溶液，浸润1h以上，提取甲状腺激素，离心上清用于定量检测甲状腺激素的含量；将B部分样品准确称量干重后加入细胞裂解液和PMSF室温放置1h以上，裂解细胞释放蛋白；用于检测样品中总蛋白含量；将数据整合，计算出幼虫中每克蛋白含甲状腺激素x克，即x g/g protein。本发明提供的方法能简单，快速，准确的测定出贝类中的甲状腺激素含量。预处理步骤简单，无毒操作。适用于两种甲状腺激素的定量检测。

主权项

一种在贝类幼虫中定量检测甲状腺激素的方法，其特征在于:该方法包括如下步骤：1）将幼虫样品用液氮研磨法研磨成粉末状；2）研磨后进行低温干燥，分成AB两部分分别用于以下步骤；3）将A部分样品准确称量干重后，按固定比例加入0.01mol/L NaOH溶液，2‑8℃下充分浸润1h以上提取甲状腺激素；4）8000‑12000rpm离心5‑10min，取上清；5）取步骤4）中的上清，用于定量检测甲状腺激素的含量；即总甲状腺素T4和总3，5，3′‑三碘甲腺原氨酸T3；6）将B部分样品准确称量干重后加入细胞裂解液和PMSF室温放置1h以上，裂解细胞释放蛋白；7）将步骤6）中裂解细胞释放蛋白用于检测样品中总蛋白含量；8）将数据整合，计算出幼虫中每克蛋白含甲状腺激素x克，即xg/gprotein。