用于定性、定量检测枣疯病植原体的引物、探针及其方法

摘要

本发明属于植物检疫技术领域，涉及用于对枣疯病植原体进行定性、定量检测的引物、探针及其检测方法。本发明根据枣疯病植原体与其它植原体在16S rDNA基因序列上的差异，设计了特异性检测枣疯病植原体的引物对JWB Primer-F：5’-TGGTGAGGTAAAGGCTTA-3’/JWB Primer-R：5’-CTCCCGTAGGAGTTT GG-3’和TapMan探针JWB-Probe：5’-FAM-AATGTGGCTGTTCAACCTCTCA-TAMRA-3’，通过建立的枣疯病植原体的实时荧光定量PCR检测方法测定Ct值，依据实时荧光定量PCR检测结果的阳性判定标准，即可实现对枣疯病植原体的定性；再由预先建立的荧光定量PCR标准曲线方程计算出检测样品中枣疯病植原体16S rDNA基因片段拷贝浓度，据此得到样品中枣疯病植原体的数量，从而实现定量检测。本发明具有灵敏度高、特异性强、重复性好、高通量等优点，可广泛应用于植物检疫、植物保护、科研等领域。

主权项

一种用于枣疯病植原体定性、定量检测的引物、探针，其特征在于，含有一条特异性循环探针和一对引物，所述引物对和探针的寡聚核昔酸序列为： 上游引物JWB Primer‑F：5’‑TGGTGAGGTAAAGGCTTA‑3’ 下游引物JWB Primer‑R：5’‑CTCCCGTAGGAGTTTGG‑3’ 探针JWB‑Probe：5’‑AATGTGGCTGTTCAACCTCTCA‑3’。