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Verfahren zur Herstellung einer DNA-Sequenz für eine Nukleinsäure-Bibliothek mit einer Vielzahl von Elementen, wobei die DNA-Sequenz jeweils mindestens drei Bereiche umfasst, wobei der erste und der dritte Bereich in jedem Element jeweils definierte Sequenzen (D1, D2) aufweist, die in allen Elementen der Nukleinsäure-Bibliothek jeweils identisch sind, wobei ein mittlerer zweiter Bereich jeweils mindestens zwei benachbarte variable Codon-Tripletts umfasst, wobei bei dem Verfahren mindestens zwei Oligonukleotid-Bibliotheken und mindestens zwei einzelsträngige Oligonukleotide mit den nachfolgenden Eigenschaften verwendet werden: • eine erste Oligonukleotid-Bibliothek (O1b) bestehend aus Oligonukleotiden (O1-x) mit jeweils einer Teilsequenz, die dem definierten ersten Bereich (D1) der Nukleinsäure-Bibliothek entspricht, mindestens einem ersten variablen Codon-Triplet (TV1), einer daran anschließenden ersten Teilsequenz (S1) eines Spacers (S) und einem definierten 3‘ Überhang (U1), • ein erstes komplementäres Oligonukleotid (O2) oder einer ersten Komplementär-Oligonukleotid-Bibliothek, wobei das erste komplementäre Oligonukleotid (O2) weitgehend komplementär zu den Oligonukleotiden (O1-x) der ersten Oligonukleotid-Bibliothek (O1b) ist, mit einer Teilsequenz (S1k), die komplementär zur ersten Teilsequenz (S1) des Spacers (S) der Oligonukleotide (O1-x) der ersten Oligonukleotid-Bibliothek (O1b) ausgebildet ist, mindestens einem ersten komplementär-variablen bzw. weitgehend komplementär-variablen Codon-Triplet (TVU) und einer Teilsequenz (D1k), die komplementär zum ersten Bereich (D1) der Oligonukleotide (O1-x) der ersten Oligonukleotid-Bibliothek (O1b) ausgebildet ist, • eine zweite Oligonukleotid-Bibliothek (O3b) bestehend aus Oligonukleotiden (O3-x) mit einer Teilsequenz, die die zweite Teilsequenz (S2) des Spacers (S) bildet, mindestens einem zweiten variablen Codon-Triplet (TV2) und einer Teilsequenz, die dem definierten zweiten Bereich (D2) der Nukleinsäure-Bibliothek entspricht; und • ein zweites komplementäres Oligonukleotid (O4) oder einer zweiten Komplementär-Oligonukleotid-Bibliothek, wobei das zweite komplementäre Oligonukleotid (O4) weitgehend komplementär zu den Oligonukleotiden (O3-x) der zweiten Oligonukleotid-Bibliothek (O3b) ist, mit einer Teilsequenz (D2k), die komplementär zum zweiten Bereich (D2) der zweiten Oligonukleotid-Bibliothek (O3b) ausgebildet ist, mindestens einem zweiten komplementär-variablen bzw. weitgehend komplementär-variablen Codon-Triplet (T2k), mit einer Teilsequenz (S2k), die komplementär zur zweiten Teilsequenz (S2) des Spacers (S) der Oligonukleotide (O3-x) der zweiten Oligonukleotid-Bibliothek (O3b) ausgebildet ist und einen daran anschließenden definierten 3‘ Überhang (U4); ... |
