| 主权项 |
1.一种利用家蚕核多角病毒于家蚕细胞中制造B型肝炎表面抗原之方法,包括:(a)构筑一重组质体PBmT824,该重组质体在原先核多角蛋白基因密码中唯一互迦,I切割位置始,朝启动子方向共165个盐基对被三个原先不存在之盐基对GAC所取代,而且在互盘切割位置之下游具有一旦登迅HI切割位置;(b)将B型肝炎表面抗原基因之DNA片段1接入该PBmT824之盘I切割位置以构筑一含B型肝炎表面抗原基因之重组质体PHBs324P;(c)哨核多角病毒DNA及PHBs324P DNA经磷酸钙沉淀,加入家蚕组织培养细胞株培养,培养涤经溶斑检定及溶斑杂交筛选出含B型肝炎表面抗原基因之重组病毒BmHBs824P;(d)以重组病毒BmHBs824P感染家蚕细胞以合成B型肝炎表面抗原蛋白质。2.如申请专利范围第1项之制造B型肝炎表面抗原之方法,其中构筑PBmT824之方法包括:将含核多角蛋白基因及其启动子之噬菌体NPVl转殖入PUC 18中得到重组质体PBmHl922,并经限制腌切割及转形作用得到含质体PPD824之转形株,以及经基因重组得到该PBmT824。3.一种利用家蚕核多角病毒于蚕体中制造B型肝炎表面抗原之方法,包括:(a)椭筑一重组质体PBmT324,该重组质体在原先核多角蛋臼基因密码中唯一XbaI切割位置始,朝启动子方向共165个盐基对被三个原先不存在之盐基对GAC所取代,而且在互迦工切割位置之下游具有一盘匆割位置;(b)哨B型肝炎表面抗原基因之DNA片段接入该PBmT324之旦强型1切割位置以构筑一含B型肝炎表面抗原基因之重组质体PHBs824P;(c)硝核多角病毒DNA及PHBs824P DNA经磷酸钙沉淀,加入家蚕组织培养细胞株培养,培养涤经溶斑检定及溶斑杂交筛选出含B型肝炎表面抗原基因之重组病毒BmH泓324P;(d)以重组病毒BmHBs824P感染蚕体以合成B型肝炎表面抗原蛋白质。4.如申请专利范围第8项之制造B肝炎表面抗原之方法,其中构筑PBmT824之方法包摇,将含核多角蛋白基因及其启动子之噬菌体NPVl转殖入PUC 18中得到重组质体PBmHl922,并经限制腌切割及转形作用得到含质体PPD824之转形株,以及经基因重组得到该PBmT324。 |
