发明名称 |
一种微生物种属分析方法 |
摘要 |
本发明提供一种微生物种属分析方法,所述的方法依次包括下列步骤:a)设计通用引物;b)以样本DNA为模板,使用步骤a)所述的通用引物扩增得到含有不同微生物基因片段的混合物,并回收产物;c)将步骤b)的产物克隆连入载体,转化感受态细胞,筛选得到阳性克隆;d)以步骤c)所述的阳性克隆为模板进行菌落PCR,回收产物;e)将步骤d)所述的产物进行测序。该方法较常规通用引物克隆测序法灵敏度和检出率明显提高,且采用的是蓝白斑筛选阳性克隆,速度快、效率高、准确性强,并可用于鉴定真菌,本发明为微生物群落多样性分析、食品微生物的检测和临床病原菌的检测提供了一种快速有效的方法。 |
申请公布号 |
CN103509851A |
申请公布日期 |
2014.01.15 |
申请号 |
CN201210202522.0 |
申请日期 |
2012.06.19 |
申请人 |
上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心 |
发明人 |
曹清;李本尚;丁丽霞;周云芳;李璧如;潘淑华;王希华 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 |
代理人 |
巫蓓丽 |
主权项 |
一种微生物种属分析方法,其特征在于,所述的方法依次包括下列步骤:a)设计通用引物;b)以样本DNA为模板,使用步骤a)所述的通用引物扩增得到含有不同微生物基因片段的混合物,并回收产物;c)将步骤b)的产物克隆连入载体,转化感受态细胞,筛选得到阳性克隆;d)以步骤c)所述的阳性克隆为模板进行菌落PCR,回收产物;e)将步骤d)所述的产物进行测序。 |
地址 |
200127 上海市浦东新区东方路1678号 |