发明名称 一种微生物种属分析方法
摘要 本发明提供一种微生物种属分析方法,所述的方法依次包括下列步骤:a)设计通用引物;b)以样本DNA为模板,使用步骤a)所述的通用引物扩增得到含有不同微生物基因片段的混合物,并回收产物;c)将步骤b)的产物克隆连入载体,转化感受态细胞,筛选得到阳性克隆;d)以步骤c)所述的阳性克隆为模板进行菌落PCR,回收产物;e)将步骤d)所述的产物进行测序。该方法较常规通用引物克隆测序法灵敏度和检出率明显提高,且采用的是蓝白斑筛选阳性克隆,速度快、效率高、准确性强,并可用于鉴定真菌,本发明为微生物群落多样性分析、食品微生物的检测和临床病原菌的检测提供了一种快速有效的方法。
申请公布号 CN103509851A 申请公布日期 2014.01.15
申请号 CN201210202522.0 申请日期 2012.06.19
申请人 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心 发明人 曹清;李本尚;丁丽霞;周云芳;李璧如;潘淑华;王希华
分类号 C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 代理人 巫蓓丽
主权项 一种微生物种属分析方法,其特征在于,所述的方法依次包括下列步骤:a)设计通用引物;b)以样本DNA为模板,使用步骤a)所述的通用引物扩增得到含有不同微生物基因片段的混合物,并回收产物;c)将步骤b)的产物克隆连入载体,转化感受态细胞,筛选得到阳性克隆;d)以步骤c)所述的阳性克隆为模板进行菌落PCR,回收产物;e)将步骤d)所述的产物进行测序。
地址 200127 上海市浦东新区东方路1678号
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