一种梅花茎尖染色体制片方法

摘要

本发明公开了一种梅花生长点染色体制片方法，其为选取梅花一年生枝条顶端生长点或经修剪后新发出的顶端生长点最内侧的长度为0.5～1.0cm的部分，依次进行卡诺固定液固定、前低渗处理、纤维素酶和果胶酶的酶解、后低渗处理，将处理后的顶端生长点进行火焰干燥法制片。本发明采用火焰法制片，省去预处理、解离、染色压片过程，直接固定，提高制片效率，拉长了染色体长度。此外，更重要的是，所得制片能够用于荧光原位杂交实验，同时解决了取材受限于早春的问题。

主权项

一种梅花生长点染色体制片方法，其为选取梅花一年生枝条顶端生长点或经修剪后新发出的顶端生长点最内侧的长度为0.5～1.0cm的部分，依次进行卡诺固定液固定、前低渗处理、纤维素酶和果胶酶的酶解、后低渗处理，将处理后的顶端生长点进行火焰干燥法制片；其中取材时间为上午9:00～11:00；所述的火焰干燥法制片包括如下步骤：切取顶端生长点基部，解剖针捣碎，平摊于载玻片上，用镊子剔除杂质，滴卡诺固定液，将载玻片置于酒精灯火焰上方，待载玻片上卡诺固定液燃烧，移开载玻片，直至载玻片干燥；前低渗处理溶液为0.075mol/L的KCl，处理时间为30min；其中用纤维素酶和果胶酶的酶溶液常温酶解1h～2h，其中，所述酶溶液中，纤维素酶的浓度为2.0～2.5%，果胶酶的浓度为2.0～2.5%；用ddH2O进行后低渗处理，处理时间30min。