发明名称 |
利用特征多肽制备家蚕丝素蛋白特异抗体的方法 |
摘要 |
本发明公开了一种利用特征多肽制备家蚕丝素蛋白特异抗体的方法:利用Fmoc法合成“CGAGAGSGAGAGS”多肽序列,并通过多肽序列的N端的半胱氨酸使该多肽与匙孔血蓝蛋白偶联得到完全抗原;用生理盐水稀释完全抗原,将稀释后的完全抗原与完全弗氏佐剂混合,然后加入链霉素和青霉素溶液进行乳化处理得到初次免疫抗原乳化液,使用初次免疫抗原乳化液对兔子进行初次免疫,然后对兔子加强免疫,加强免疫使用的加强免疫抗原乳化液是由稀释后的完全抗原与不完全弗氏佐剂混合,然后再加入链霉素和青霉素溶液进行乳化处理得到;当兔子血样中的抗体的效价达到1/10000时,收集免疫后的兔子的血液,并使血块充分收缩及抗血清完全析出,然后收集抗血清并离心处理得到上清液。 |
申请公布号 |
CN103509107A |
申请公布日期 |
2014.01.15 |
申请号 |
CN201310342720.1 |
申请日期 |
2013.08.07 |
申请人 |
浙江大学;中国丝绸博物馆 |
发明人 |
郑秦;吴小锋;郑海玲;周旸 |
分类号 |
C07K16/18(2006.01)I;C07K16/06(2006.01)I |
主分类号 |
C07K16/18(2006.01)I |
代理机构 |
杭州求是专利事务所有限公司 33200 |
代理人 |
陈昱彤 |
主权项 |
一种利用特征多肽制备家蚕丝素蛋白特异抗体的方法,其特征是,包括以下步骤:步骤一:利用Fmoc法合成序列为 “CGAGAGSGAGAGS”的多肽,并通过所述多肽的N端的半胱氨酸使该多肽与匙孔血蓝蛋白偶联得到完全抗原;步骤二:用生理盐水稀释所述完全抗原,将稀释后的完全抗原与完全弗氏佐剂混合,然后再加入链霉素和青霉素溶液进行乳化处理得到初次免疫抗原乳化液,使用初次免疫抗原乳化液对兔子进行初次免疫,然后对兔子进行加强免疫,加强免疫使用的是加强免疫抗原乳化液;所述加强免疫抗原乳化液是由所述稀释后的完全抗原与不完全弗氏佐剂混合,然后再加入链霉素和青霉素溶液进行乳化处理得到;当兔子血样中的抗体的效价达到1/10000时,收集免疫后的兔子的血液,并使血块充分收缩及抗血清完全析出,然后收集抗血清并离心处理得到上清液。 |
地址 |
310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号 |