发明名称 非对称二甲基精氨酸浓度的测定方法及测定试剂
摘要 本发明公开了一种非对称二甲基精氨酸浓度的测定方法:将待测样本在酶循环反应系统中,进行反应,测定酶循环反应生成的氨的生成速率并计算,即得待测样本中非对称二甲基精氨酸含量;所述的酶循环反应系统包括二甲基精氨酸二甲胺水解酶、瓜氨酸水解酶、鸟氨酸氨甲酰转移酶、以及氨基甲酰磷酸或其盐。本发明还公开了与该方法相应的测定试剂。本发明首次建立了非对称二甲基精氨酸的酶学测定方法及测定试剂。本发明方法无需特殊仪器、操作简便、灵敏度高且成本低廉,可实现临床快速、大流量的样本检测,使非对称二甲基精氨酸成为临床上常规检测项目成为可能,具有极高的科学和经济价值。
申请公布号 CN102243227B 申请公布日期 2014.01.15
申请号 CN201110081525.9 申请日期 2011.03.24
申请人 浙江亚太药业股份有限公司 发明人 王学忠
分类号 C12Q1/34(2006.01)I 主分类号 C12Q1/34(2006.01)I
代理机构 上海智信专利代理有限公司 31002 代理人 薛琦;钟华
主权项 1.一种非对称二甲基精氨酸浓度的测定方法,其特征在于其包括如下步骤:将待测样本在酶循环反应系统中,进行如式1~3所示的反应,测定酶循环反应生成的氨的生成速率并计算,即得待测样本中非对称二甲基精氨酸含量;所述的酶循环反应系统包括二甲基精氨酸二甲胺水解酶、瓜氨酸水解酶、鸟氨酸氨甲酰转移酶、以及氨基甲酰磷酸或其盐;<img file="FDA0000374839620000011.GIF" wi="1774" he="126" />式1<img file="FDA0000374839620000012.GIF" wi="1475" he="117" />式2<img file="FDA0000374839620000013.GIF" wi="1748" he="117" />式3;所述的二甲基精氨酸二甲胺水解酶的用量为1~100kU/L;和/或,所述的瓜氨酸水解酶的用量为1~100kU/L;和/或,所述的鸟氨酸氨甲酰转移酶的用量为1~100kU/L;和/或,所述的氨基甲酰磷酸或其盐的用量为0.1~50mmol/L;所述的酶循环反应系统为pH6~9的缓冲液体系;所述的缓冲液为磷酸盐缓冲液、Tris缓冲液或N-(2-羟乙基)哌嗪-N’-(2-乙基磺酸)缓冲液;所述的缓冲液的浓度为20~300mmol/L。
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