对磷酸氢二铵耐受的枯草芽孢杆菌的筛选方法

摘要

本发明属于微生物领域，涉及一种对磷酸氢二铵耐受的枯草芽孢杆菌的筛选方法，包括如下过程：(1)筛选：将CGMCC保藏的编号为1.0769的枯草芽孢杆菌，以营养琼脂为培养基，先进行试管斜面培养，然后再进行培养皿斜面划线培养后筛选出典型的枯草芽孢杆菌的单菌落；将典型的枯草芽孢杆菌转入营养琼脂试管斜面，进行培养；(2)驯化：在营养琼脂培养基里增加磷酸氢二铵，制成磷酸氢二铵浓度不同的培养皿，逐步提高磷酸氢二铵浓度进行筛选驯化培养，筛选出能够耐受较高浓度磷酸氢二铵的枯草芽孢杆菌。得到能够耐受质量浓度为20％磷酸氢二铵的枯草芽孢杆菌，这种枯草芽孢杆菌可用于肥料。

主权项

一种对磷酸氢二铵耐受的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的筛选方法，其特征在于包括如下过程：(1)筛选：将枯草芽孢杆菌CGMCC 1.0769，以营养琼脂为培养基，所述营养琼脂组成为：每1000ml水用蛋白胨10克、牛肉粉3.0克和氯化钠5.0克，pH值为7.3±0.1；先进行试管斜面培养，然后再进行培养皿斜面划线培养后筛选出典型的枯草芽孢杆菌的单菌落；将典型的枯草芽孢杆菌转入营养琼脂试管斜面，进行培养；(2)驯化：在营养琼脂培养基里增加磷酸氢二铵，制成磷酸氢二铵质量浓度分别为10％、15％、20％和25％不同的培养皿，把步骤(1)中最后培养得到的枯草芽孢杆菌先在磷酸氨二铵浓度较低的培养皿中划线培养；将培养的单菌落转移到试管斜面培养后作为菌种，再在下一个磷酸氢二铵浓度较高的培养皿中划线培养，以此类推，逐步提高磷酸氢二铵浓度，筛选出能够耐受较高浓度磷酸氢二铵的枯草芽孢杆菌。