用于发现编码杀虫剂的新型核酸分子的细菌信使核糖核酸筛选策略

摘要

本发明提供了从鉴定为具有杀虫多肽的细菌菌株中分离和鉴定编码杀虫剂的新型核酸分子的方法。所述方法涉及挑选具有或疑似具有至少一个编码杀虫剂的质粒的细菌菌株、消除来自所述细菌菌株的所述至少一个编码杀虫剂的质粒，以及进行消减杂交以获得编码所述杀虫多肽的质粒mRNA。可使用所述质粒mRNA来制备cDNA文库，从所述cDNA文库可以分离并随后鉴定出所述杀虫多肽。

主权项

一种用于鉴定至少一种编码具有杀虫活性的多肽的多核苷酸的方法，所述方法包括以下步骤：(a) 提供具有或疑似具有编码杀虫剂的核苷酸序列的细菌菌株；(b) 消除来自所述细菌菌株的质粒，从而形成对照菌株；(c) 对所述对照菌株和所述具有所述编码杀虫剂的核苷酸序列的细菌菌株（靶菌株）的所述多核苷酸序列进行消减杂交，以鉴定疑似编码所述具有杀虫活性的多肽的序列；以及(d) 鉴定至少一种具有杀虫活性的多肽。