一种同时测定酒花中α-酸、β-酸和异α-酸的方法

摘要

本发明公开了一种用反相高效液相色谱同时检测酒花中α-酸、β-酸和异α-酸的方法，实现3种α-酸、3种β-酸和3种异α-酸9种物质的同时快速有效地分离。其特征在于：色谱条件为色谱柱：EC 250/4Nuclesoil 100-5C18，流动相A：水溶液（磷酸0.1%，0.2mM EDTANa2）；流动相B：乙腈。流速为1.0mL/min，双波长检测UV270nm和UV315nm，柱温30℃，进样体积为10μL。该发明在酒花异构颗粒和异构浸膏的生产过程，监测酒花中α-酸、β-酸和异α-酸的变化关系，为生产工艺提供理论参考。同时该检测方法也可用于麦汁煮沸过程酒花的α-酸与异α-酸的动力学变化的研究。方法的稳定性和重现性好，操作简单、准确可靠。

主权项

一种同时测定酒花中α‑酸、β‑酸和异α‑酸的方法，其特征包括以下步骤：1）样品制备：取磨成粉末状的颗粒酒花样品5.0g，置于250mL具塞锥形瓶中，用10‑30mL甲醇和70‑100mL乙醚萃取，于恒温20℃摇床振荡30min，加入0.1mol/L盐酸溶液30‑50mL，再振荡30min，静置30min使其分层；取上层乙醚层5mL，用甲醇定容至50mL，充分均匀，用0.45μm有机滤膜过滤，存于样品瓶中，准备进样；或取酒花浸膏样品0.1g，置于50mL烧杯中，用40mL甲醇溶解，置于超声波水浴10‑20min，转移至100mL容量瓶中，用甲醇定容，充分混匀；用0.45μm有机滤膜过滤，存于样品瓶中，准备进样；2）将步骤1）制备好的样品用反相高效液相色谱分析，分析条件如下：色谱柱：EC250/4Nuclesoil100‑5C18；洗脱条件：流动相：有机相B为乙腈；无机相A为含有磷酸0.1%、0.2mM EDTANa2的水溶液；所述磷酸的浓度为85%；采用梯度洗脱方法，洗脱程序为：0‑30min，0%B‑60%B；30‑32min，60%B‑70%B；32‑50min，70%B‑75%B；50‑55min，75%B‑60%B；进样体积10μL，流速1.0mL/min，柱温30℃；检测波长：异α‑酸的检测波长270nm，α‑酸和β‑酸的检测波长315nm。