人表皮细胞生长因子核酸序列及大肠杆菌表达载体

摘要

人表皮细胞生长因子核酸序列及大肠杆菌表达载体，涉及基因工程和多肽类药物。新的人表皮细胞生长因子DNA，具有SEQ ID No.1所示核苷酸序列。大肠杆菌表达载体pBADME包括SEQ ID No.1所示核苷酸序列的载体。根据人表皮细胞生长因子hEGF全长序列设计引物，并替换掉密码子中的ACA序列以获得不含ACA序列的hEGF基因，再将hEGF-ACA-基因序列克隆进入pBADM载体，重组成表达载体pBADME；将构建好的表达载体pBADME分别转化至大肠杆菌BL-21/JM109，培养至OD600达到3，再培养至OD600达到0.5，用IPTG与阿拉伯糖双诱导，得人表细胞皮生长因子。

主权项

人表皮细胞生长因子DNA(hEGF‑ACA‑)，其特征在于具有SEQ ID No.1所示核苷酸序列，该核苷酸序列共有162个核苷酸，由人工合成获得，其中，最后3个TAA为终止密码子，除外加TAA终止密码子外，分别是第81个碱基与第111个碱基的胞嘧啶（C）突变为胸腺嘧啶（T）。