发明名称 滇重楼的分子鉴定方法
摘要 本发明公开了一种滇重楼的分子鉴定方法,属分子标记技术领域。该方法将待鉴定样品PCR反应获得扩增产物测序后,与滇重楼条形码比对,当扩增产物的序列与滇重楼条形码所示的碱基序列的相似性达到98.2%以上,且在位点1-4的碱基为CTGA、在位点19的碱基缺失、在位点77的碱基都为C、在位点138的碱基都为C、在位点792的碱基为G、在位点1110-1113的碱基为GGCG、在位点1116的碱基为G和在位点1119-1120的碱基为CC时,该待鉴定样品为滇重楼。本发明克服了用感官审评或理化分析等方法难以鉴别滇重楼的真伪以及重楼属下不同重楼植物的技术问题,能有效、简便快速地对滇重楼植物进行鉴定。
申请公布号 CN103484558A 申请公布日期 2014.01.01
申请号 CN201310484979.X 申请日期 2013.10.16
申请人 云南农业大学 发明人 刘涛;杨生超;谢世清;年丽菊;李玛;王玲
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 昆明合众智信知识产权事务所 53113 代理人 康珉
主权项 滇重楼的分子鉴定方法,包括以下步骤:(1)对待鉴定样品进行总DNA提取;(2)PCR反应,以步骤(1)提取的总DNA为模板,用psbA/trnH引物扩增,获得扩增产物,所述的psbA/trnH引物由上游引物psbA和下游引物trnH组成,所述的上游引物psbA的碱基序列如SEQ ID NO:1所示,下游引物trnH的碱基序列如SEQ ID NO:2所示;(3)将扩增产物测序后与滇重楼条形码比对,所述的滇重楼条形码的碱基序列如SEQ ID NO:3所示,当扩增产物的序列与SEQ ID NO:3所示的碱基序列的相似性达到98.2%以上,且在位点1‑4上的碱基为CTGA、在位点19上的碱基缺失、在位点77上的碱基都为C、在位点138上的碱基都为C、在位点792上的碱基为G、在位点1110‑1113上的碱基为GGCG、在位点1116上的碱基为G和在位点1119‑1120上的碱基为CC时,该待鉴定样品为滇重楼。
地址 650201 云南省昆明市北郊黑龙潭云南农业大学