11-氧乙酰鸟巢烷三醇和15-氧乙酰鸟巢烷三醇的生产方法及其专用菌株

摘要

本发明公开了一种利用微生物发酵制备式II和/或式III所示的化合物的方法及其专用菌株。该菌株为非洲黑蛋巢（Cyathus africanus）L38，其在微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的保藏编号为CGMCC NO.6259。本发明的方法，包括以下步骤：1）将发酵非洲黑蛋巢L38接种到固体培养基上进行固体发酵培养；2）在发酵后的体系中加入有机溶剂浸泡提取得到提取液，将所述提取液减压蒸馏，得到含有式II所示化合物和式III所示化合物的粗提物。本发明利用非洲黑蛋巢L38发酵制备化合物式II和式III所示化合物，并且对该菌采用多种条件进行培养，检测了该化合物的最佳获取时期，均可得到较高的产率。(式Ⅱ） (式Ⅲ）

CGMCC No62592012.07.04

主权项

1.一种制备式II所示化合物和式III所示化合物的方法，包括以下步骤： 1）将非洲黑蛋巢（Cyathus africanus）L38CGMCC NO.6259接种到固体培养基上进行固体发酵培养； 2）在步骤1）发酵后的体系中加入有机溶剂浸泡提取得到含有式II所示化合物和式III所示化合物的提取液，将所述提取液减压蒸馏，得到含有式II所示化合物和式III所示化合物的粗提物； 其中，步骤1）中，所述固体培养基由基材和水混合得到，所述基材选自小麦、粳米、玉米、糯米、芡实、籼米和薏米中的一种或两种以上任意组合；所述固体培养基的含水量是所述的基材总重量的100-150%； 所述步骤1）中，所述固体发酵培养的培养条件是18-28℃，避光静止培养20-60天； 所述方法中，还包括将步骤2）获得的粗提物用硅胶柱层析分离，以氯仿和丙酮的混合液为溶剂，按照溶剂中氯仿和丙酮的比例依次是100:0、100:1、50:1、30:1、20:1、10:1、5:1、3:1、2:1的洗脱梯度进行梯度洗脱，每个梯度洗脱溶剂1500毫升，每350毫升收集为一个流份；将氯仿和丙酮的比例为10:1的洗脱溶剂洗脱的第二个流份减压浓缩干燥后溶解于10毫升甲醇溶液中，室温静置，析出无色结晶，得到式Ⅱ所示的化合物；将氯仿和丙酮的比例为10:1的洗脱溶剂洗脱的第三个流份减压浓缩干燥后溶解于10毫升甲醇溶液中，室温静置过夜，析出无色结晶，得到式Ⅲ所示的化合物； 。