定点突变获得的谷氨酸脱羧酶突变体基因及其编码蛋白质和应用

摘要

本发明公开了一种谷氨酸脱羧酶突变体，酶活性中心附近的酸性氨基酸谷氨酸突变为中性氨基酸，其DNA序列分别为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2，该突变体蛋白的氨基酸序列分别为SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4。本发明利用DNA定点突变技术，对野生型谷氨酸脱羧酶GadB1编码基因进行分子改造，得到了两种突变体酶GadB1E312S和GadB1E91Q，相对野生酶其有效pH作用范围得到一定的扩展，尤其在偏中性pH条件下仍具有较好的活性。随着有效pH作用范围的拓宽，突变酶在pH5.5～6.5条件下，仍然具有较高的催化活性，因此解决了谷氨酸脱羧酶催化GABA生物合成时，在pH5.5～6.5时，催化能力低的问题，为利用该酶及其编码基因来生物合成GABA创造好的条件。

主权项

一种谷氨酸脱羧酶突变体，其特征在于酶活性中心附近的酸性氨基酸谷氨酸突变为中性氨基酸。