发明名称 |
检测HLA-B*5801等位基因的方法 |
摘要 |
本发明属药物基因组学和基因诊断领域,涉及检测HLA-B*5801等位基因的方法,包括:取待测样本DNA,用三对特异性引物和一对内参引物,用序列特异性引物法扩增DNA片段后用琼脂糖凝胶电泳分析扩增结果,或,抽提样本DNA后,用一对特异性引物、一对内参引物和3条荧光探针,用Taqman探针法在荧光定量PCR仪上扩增DNA片段,通过扩增曲线分析结果。本方法可结合琼脂糖凝胶电泳、高分辨率熔解曲线、SYBRGreen荧光定量PCR等结果判读工具,具有快速、简便、灵活、分辨率高、无污染等特点,适用检测外周血、毛发等样本中HLA-B*5801等位基因,用以判断痛风或高尿酸血症患者服用别嘌呤醇后出现严重皮肤不良反应的概率。 |
申请公布号 |
CN103484533A |
申请公布日期 |
2014.01.01 |
申请号 |
CN201310227137.6 |
申请日期 |
2013.06.08 |
申请人 |
复旦大学附属华山医院 |
发明人 |
邹和建;张心菊;于波;关明;张炯;骆肖群;张伟;万峻;吕元 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 |
代理人 |
吴桂琴 |
主权项 |
检测HLA‑B*5801等位基因的方法,其特征在于,其包括:获得抽提的待测样本DNA后,使用三对特异性引物和一对内参引物,用序列特异性引物法扩增DNA片段后用琼脂糖凝胶电泳分析扩增结果,或,抽提样本DNA后,使用一对特异性引物、一对内参引物和3条荧光探针,采用Taqman探针法在荧光定量PCR仪上扩增DNA片段;通过扩增曲线分析结果;包括步骤:(1)获得抽提的待测样本DNA;(2)设计三对特异性引物和1对内参引物,或,一对特异性引物和相应的2条荧光探针,以及1对内参引物和1条相应荧光探针;(3)进行PCR‑SSP扩增;扩增结束后,通过琼脂糖凝胶电泳分析待测样本中是否有扩增产物;或,在荧光定量PCR仪上进行PCR‑SSP扩增后,根据荧光扩增曲线分析待测样本中是否有扩增产物;(4)分析待测样本是否携带HLA‑B*5801等位基因。 |
地址 |
200031 上海市静安区乌鲁木齐中路12号 |