一种肿瘤细胞系的构建方法

摘要

本发明的目的是提供一种可以高效刺激DC细胞致敏的抗原来源，即从肿瘤组织中分离得到肿瘤细胞，然后通过基因（bcl-2和erbB-1）的转染，使其形成个体化的肿瘤细胞系，从而达到可以连续多次、高效刺激致敏DC细胞，使其将抗原递呈T淋巴细胞后，产生高效特异性杀伤功能的CTL细胞的方法。

主权项

一种肿瘤细胞系的构建方法，包括如下的步骤：1）从肿瘤组织分离浓缩肿瘤细胞：用RPMI 1640培养基冲洗肿瘤组织；再用将肿瘤组织剪碎研磨后离心收集肿瘤细胞；用RPMI 1640培养基重悬肿瘤细胞制成细胞悬液；将细胞悬液加在肿瘤细胞分离液上，离心后从液体界面中间收集白色细胞层，将收集细胞用RPMI 1640培养基稀释后接种到细胞培养板中；2）基因转染：细胞贴壁后，将含有特定基因的慢病毒加入到细胞培养板中进行转染，病毒滴度大于107单位/毫升；3）将基因转染后的肿瘤细胞培养基进行培养，培养3‑5天后，将培养的肿瘤细胞用胰蛋白酶酶解，进行细胞传代建立肿瘤细胞系。