一种利用超声波强化酶促合成植物甾醇酯/植物甾烷醇酯的方法

摘要

本发明涉及一种甾醇酯的制备方法。一种利用超声波强化酶促合成植物甾醇酯/植物甾烷醇酯的方法，其特征在于它包括如下步骤：1)配制非均相酶反应体系：按摩尔比1∶1.2-2称取植物甾醇/植物甾烷醇酯和脂肪酸，然后加入反应溶剂；然后加入酶和分子筛；2)超声辅助酶促酯化：将超声波探头浸入反应溶液，开启超声波发生器，在机械搅拌下进行持续超声波辐射，辐射时间0.5-3h，辐射完毕后保持在机械搅拌下继续反应4-10h；3)超声辅助皂化去除脂肪酸，得到产品。本发明不但可以显著缩短酶促酯化反应的时间并减少酶的使用量，并且可以加快过量脂肪酸的皂化反应速度，从而提高分离纯化的效率，得到的甾醇酯/甾烷醇酯产品具有色泽浅、纯度高、安全无污染的特点。

主权项

一种利用超声波强化酶促合成植物甾醇酯/植物甾烷醇酯的方法，其特征在于它包括如下步骤： 1）配制非均相酶反应体系：按摩尔比1:1.2‑2称取植物甾醇/植物甾烷醇和脂肪酸，加入反应釜中，然后加入反应溶剂，保持植物甾醇或植物甾烷醇浓度为100‑200mmol/L；然后加入酶和分子筛，酶加入量为6‑20g/L，分子筛加入量为20‑60g/L，反应温度控制在50‑60℃，采用机械搅拌充分混匀； 所述的酶为活力大于10000U/g的游离或固定化的脂肪酶，包括来源于微生物发酵的皱褶假丝酵母、解脂假丝酵母、南极假丝酵母或洋葱假单胞菌脂肪酶； 2）超声辅助酶促酯化：保持反应体系温度在50‑60℃之间，将超声波探头浸入反应溶液，开启超声波发生器，在机械搅拌下进行持续超声波辐射，辐射时间0.5‑3h，辐射完毕后保持在机械搅拌下继续反应4‑10h； 3）超声辅助皂化去除脂肪酸：待反应体系温度降至室温，离心除去酶和分子筛，减压蒸馏出反应溶剂，得到甾醇酯粗品或甾烷醇酯粗品；加入甾醇酯粗品或甾烷醇酯粗品体积0.4‑0.6倍的5wt%碳酸氢钠水溶液进行脂肪酸皂化，温度在40‑60℃，搅拌速度为100‑200rpm，开启超声波发生器持续辐射5‑30min，然后停止超声，继续搅拌5‑25min，皂化完毕后，得到甾醇酯/甾烷醇酯和脂肪酸皂混合物；采用该甾醇酯/甾烷醇酯和脂肪酸皂混合物体积1.5‑2倍的有机溶剂萃取甾醇酯/甾烷醇酯，有机溶剂层回收，减压除去有机溶剂，即得到精制的植物甾醇酯/植物甾烷醇酯。