快速鉴定滇重楼皂甙组成的检测方法及其应用

摘要

本发明公开一种快速鉴定滇重楼皂甙组成的检测方法及其应用，采用四级杆-静电场轨道阱高分辨质谱检测、并通过对已知重楼皂甙的质谱裂解规律的分析，二级质谱碎片采用高能碰撞诱导解离(HCD)方式获得，较常规的碰撞诱导解离CID能获得更多的低质量端碎片，对化合物的结构解析十分有用，建立了采用高分辨质谱仪对未知的滇重楼皂甙组成进行快速研究鉴定的技术方法，采用液相高分辩质谱联机检测鉴定技术对滇重楼中未知甾体皂甙组成进行分析鉴定，共鉴定发现了滇重楼含有17种重楼皂甙、其中发现的3种新甾体皂甙还未有报道、5种为新发现的重楼皂甙组分。

主权项

一种快速鉴定滇重楼皂甙组成的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：a.样品提取：称取适量滇重楼样品用甲醇超声提取离心分离过微孔滤膜,制得样品溶液；b.采用C18色谱柱：150×2.1mm,5μm，以水和乙腈为流动相，进行梯度洗脱，梯度洗脱比例为0～2min，水为95体积份，乙腈为5体积份；2～5min，水为95→75体积份，乙腈为5→25体积份；5～20min，水为75→67体积份，乙腈为25→33体积份；20～45min，水为67→50体积份，乙腈为33→50体积份；45～52min，水为50→5体积份，乙腈为50→95体积份；设置流速为0.1～0.8min,检测波长为190～210nm,进样量为2～20μL,柱温控制在20～45℃；c.采用四级杆‑静电场轨道阱高分辨质谱分析，采用四级杆‑静电场轨道阱高分辨质谱分析，质谱条件为：离子化方式HESI（+），喷雾电压+3.2KV/‑3.0KV,鞘气40arb，辅助气10arb，毛细管加热温度：300℃，加热温度350℃，扫描方式：全扫；扫描范围m/z100～1500；裂解方式HCD。