发明名称 |
用DNA检测技术分析羊绒质量的方法 |
摘要 |
本发明是一种用DNA检测技术分析羊绒质量的方法,其检测过程为:先从待测样品上提取DNA,再用绵羊或山羊探针进行实时聚合酶链式反应,最后对反应结果进行数值分析得出样品中山羊绒或绵羊绒的含量。聚合酶链式反应的过程为,先制备绵羊TaqMan MGB探针和山羊TaqMan MGB探针,在试管内,分别与待测样品DNA进行聚合酶链式反应,反应所加试剂有:1xPCR缓冲液、MgCl2、dNTP、PCR正向引物、PCR反向引物、TaqMan MGB探针、GoldTaq DNA聚合酶、DNA样品,反应温度95℃,11分钟,40个循环,每个循环:94℃ 30秒,65℃ 30秒,反应过程中实时测定试管内液体的相对荧光量。 |
申请公布号 |
CN102146431B |
申请公布日期 |
2013.12.25 |
申请号 |
CN201010101434.2 |
申请日期 |
2010.01.27 |
申请人 |
宁夏鼎实生物鉴定中心(有限公司) |
发明人 |
计皖 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
宁夏专利服务中心 64100 |
代理人 |
叶学军 |
主权项 |
用DNA检测技术分析羊绒质量的方法,其特征在于其检测过程为:先从待测样品上提取DNA,再用绵羊或山羊探针进行实时聚合酶链式反应,最后对反应结果进行数值分析得出样品中山羊绒或绵羊绒的含量;上述实时聚合酶链式反应的过程为,先制备绵羊TaqMan MGB探针和山羊TaqMan MGB探针,在试管内,分别与待测样品DNA进行聚合酶链式反应,反应所加试剂有:1 × PCR 缓冲液、MgCl2、dNTP、PCR正向引物、PCR反向引物、TaqMan MGB探针、GoldTaq DNA 聚合酶和DNA样品,反应温度95℃,11分钟, 40个循环,每个循环:94 ℃ 30秒,65℃ 30秒,反应过程中实时测定试管内液体的相对荧光量;上述绵羊TaqMan MGB探针为:FAM‑ataattataaaaacaaaa‑MGB,山羊TaqMan MGB探针:FAM‑ataattacagaaacaaaa‑MGB, 其中,FAM 是荧光染料,MGB是淬光剂;上述山羊绒含量的分析过程为:先制备不同山羊DNA浓度的标准样,进行实时聚合酶链式反应,测定其相对荧光量,根据结果制出标准曲线或归纳线性方程式,对待测样品在同等条件下进行实时聚合酶链式反应,测定其相对荧光量,对照结果可以得出样品中山羊绒含量;上述绵羊绒含量的分析过程为:先制备不同绵羊DNA浓度的标准样,进行实时聚合酶链式反应,测定其相对荧光量,根据结果制出标准曲线或归纳线性方程式,对待测样品在同等条件下进行实时聚合酶链式反应,测定其相对荧光量,对照结果可以得出样品中绵羊绒含量。 |
地址 |
750002 宁夏回族自治区银川市金凤区庆丰街135号 |