发明名称 一种针对蚊媒病毒的悬浮芯片多重非诊断性检测方法
摘要 本发明公开了一种蚊媒病毒的悬浮芯片多重非诊断性检测方法,还涉及对悬浮芯片非诊断性检测方法中反应条件及步骤的改进。本方法中的芯片主要由带有标签微球、带有标签及生物素化的引物、链霉亲和素-藻红蛋白组成。本发明主要针对野外采集的蚊虫综合检测多种携带的病原体,如黄病毒属病毒、甲病毒属病毒等。将野外采集蚊虫样本同批次处理后高通量检测,经济、高效检测蚊传病原体,可为卫生防病部门提供简化的检测、监测步骤和程序,提高效率和减少重复工作量。
申请公布号 CN102943128B 申请公布日期 2013.12.25
申请号 CN201210420139.2 申请日期 2012.10.29
申请人 中国检验检疫科学研究院 发明人 王静;王旺;杨宇;刘丽娟;赵婷婷;韩辉;孙肖红
分类号 C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/70(2006.01)I
代理机构 北京中创阳光知识产权代理有限责任公司 11003 代理人 张飙
主权项 1.一种针对蚊媒病毒的悬浮芯片多重非诊断性检测方法,其特征在于,该方法具体为:1)根据PCR扩增区域内的核苷酸序列设计特异性检测引物,并提交GENEBANK检测引物的特异性,合成时将上游引物5’末端连接特异Tag,下游引物5’末端进行生物素标记;2)PCR反应结束后将反应产物分别与相应的编码微球杂交;3)微球上的Anti-Tag在一定的条件下特异的捕获PCR产物上的Tag序列;4)加入链霉亲和素-藻红蛋白与微球上捕获的PCR产物上的生物素结合,利用悬浮芯片LUMINAX系统进行检测,通过激发微球基质上的红色分类荧光和微球表面经特异性反应结合上的藻红蛋白,对待检测物进行定性和定量分析;其中,所涉及的引物序列为:<img file="418783DEST_PATH_IMAGE001.GIF" wi="622" he="858" />。
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