同向串联共表达双色荧光蛋白报告基因载体(独立融合表达型)

摘要

本发明涉及同向串联共表达双色荧光蛋白报告基因载体pDsRed2-IRES-EGFP substantive fusion(独立融合表达型)。它是在pIRES2-EGFP的基础上，将DsRed2、IRES经重叠延伸PCR和基因亚克隆操作而得。将目的基因克隆入本载体的DsRed2 3`端MCS1区或EGFP5`端MCS2区并转染细胞，pCMV启动转录包含DsRed2或DsRed2及其3`端融合目的基因、IRES和EGFP或EGFP及其5`端目的基因的全长mRNA，含DsRed2部分由5`帽子结构起始翻译，EGFP部分由IRES介导独立翻译。成熟蛋白中的融合DsRed2或EGFP能被目的基因产物携带在细胞内进行转运、分布，并对该过程进行示踪。优化的两MCS序列适合更广泛外源基因片段的克隆操作；DsRed2和EGFP的检测时效范围宽，且相互独立、互为表征，成像效果清晰、鲜明，使实验操作更简便、高效。

主权项

一种DNA分子，其特征是：经IRES序列串联的可同向串联共表达双色荧光蛋白报告基因载体pDsRed2‑IRES‑EGFP substantive fusion(独立融合表达型)，具有SEQ NO.1中第591‑2642nt的DNA序列。