一种茅苍术试管苗培养的快速繁殖方法

摘要

本发明涉及一种茅苍术试管苗的快速繁殖方法。工艺步骤为：茅苍术无菌外植体的获得，腋芽的诱导、腋芽的增值、生根诱导，壮苗培养，氯化钙调控试管苗酶的活性及茅苍术挥发油含量等步骤，本发明方法所制备的茅苍术试管苗含有较高含量的次生代谢物含量。本发明方法发明了利用氯化钙对茅苍术试管苗进行有目的的调控，可以在短期内获得大量次生代谢物含量高的茅苍术试管苗，进行大规模的工业化生产，并能有效降低生产成本。

主权项

一种茅苍术试管苗培养的快速繁殖方法，包括无菌外植体的获得、腋芽的诱导、腋芽的增值、生根诱导，壮苗培养，氯化钙调控试管苗酶的活性及次生代谢物的含量，其主要步骤如下：（1）按照植物组织培养常规消毒方法对野外采取的茅苍术芽进行消毒处理，获得无菌的外植体；（2）将步骤（1）获得的无菌茅苍术芽接种到芽诱导培养基中进行诱导，诱导出来萌发的腋芽接种入增值培养基中进行丛生芽增值，增值培养3‑4代，获得长势良好带有叶片的丛生芽；（3）将步骤（2）获得的丛生芽接种到附加激素0.2‑0.5 mg/L2，4‑D和0.5‑1.5 mg/L TDZ的WPM培养基中进行生根诱导培养，获得完整的茅苍术试管苗；（4）将步骤（3）获得的生长强壮的茅苍术试管苗接种入WPM+0.5mg/L2，4‑D+1mg/LTDZ+GA2mg/L氯化钙2‑6mg/L，培养一段时间取茅苍术试管苗叶片， 60℃烘干保存干样，取样提取，检测挥发油中各成分的含量。