一种灵芝醇提物中灵芝酸A、B、C₂含量的测定方法

摘要

本发明公开了一种灵芝醇提物的质量控制方法，将灵芝醇提物中的灵芝酸A、B、C2含量之和作为质量控制指标；灵芝醇提物以甲醇作为溶剂，超声提取，灵芝酸A、灵芝酸B经高效液相色谱柱C8分离；灵芝酸C2经高效液相色谱柱C18分离，分别用二极管阵列检测器检测，根据色谱峰的保留时间定性，峰面积外标法定量，分别测定试样中灵芝酸A、B和灵芝酸C2的含量，并计算其总量。赤芝、紫芝及松杉灵芝均含有相对含量较高的特征成分灵芝酸A、B、C2。对比目前常用的比色法测定总三萜含量的方法，特异性强，可达到鉴别和质量控制的目的。

主权项

1.一种灵芝醇提物中灵芝酸A、B、C₂含量的测定方法，其特征在于：灵芝醇提物以甲醇作为溶剂，超声提取，灵芝酸A、灵芝酸B经高效液相色谱柱C₈分离，灵芝酸C₂经高效液相色谱柱C₁₈分离，分别用二极管阵列检测器检测，根据色谱峰的保留时间定性，峰面积外标法定量，分别测定试样中灵芝酸A、B和灵芝酸C₂的含量，并计算其总量；灵芝醇提物的制法：灵芝经粉碎成粗颗粒，加8-10倍量质量分数为90%的乙醇溶液浸泡2-5小时，70℃-80℃加热2小时，过滤，再加8-10倍量的质量分数为90%的乙醇溶液，70℃-80℃加热2小时，过滤，合并两次滤液，浓缩回收乙醇，待浓缩至近干时，测定总固体含量，需要时，加适量辅料，混合均匀后干燥至水分低于5%，粉碎过筛即得；灵芝酸A、B含量测定：（1）灵芝酸A、B测定的色谱条件：以辛烷基键合硅胶为键合相，乙腈为流动相A，体积分数为0.1 %的醋酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱；检测波长为257 nm；柱温为22 ℃；流速为1.0 ml/min；理论板数按灵芝酸A计算不低于5000；梯度洗脱条件如下：（2）对照品溶液的制备：取减压干燥至恒重的灵芝酸A、B对照品，加甲醇制成每1 ml含20 μg灵芝酸A和每1ml含15 μg灵芝酸B的混标溶液；（3）供试品溶液的制备：取灵芝醇提物0.2 g，置100 ml容量瓶中，加甲醇超声处理25 min，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过；（4）测定法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各 20 μl，注入液相色谱仪，测定，用主峰保留时间定性，峰面积定量；灵芝酸C₂含量测定：（1）灵芝酸C₂测定的色谱条件：以十八烷基键合硅胶为键合相，乙腈为流动相A，体积分数为0.1 %的醋酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱；检测波长为257 nm；柱温为20 ℃；流速为1.0 ml/min；理论板数按灵芝酸C₂计算不低于5000；梯度洗脱条件如下：（2）对照品溶液的制备：取减压干燥至恒重的灵芝酸C₂对照品，加甲醇制成每1 ml含10 μg灵芝酸C₂ 的对照品溶液；（3）供试品溶液的制备：取灵芝醇提物0.2 g，置100 ml容量瓶中，加甲醇超声处理25 min，放冷，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过；（4）测定法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各 20 μl，注入液相色谱仪，测定，用主峰保留时间定性，峰面积定量。