发明名称 一种大蒜试管鳞茎的诱导方法
摘要 本发明公开了一种大蒜试管鳞茎诱导的新方法。主要用4℃低温处理大蒜幼嫩花苞诱导气生鳞芽,在MS+2.5mgKT+0.5mgNAA培养基上复壮气生鳞芽,在不加激素的MS+60g/L蔗糖培养基上诱导试管鳞茎,提高用气生鳞茎做种子进行大蒜快繁的繁殖效率,降低了成本。本发明的积极效果是,利用该方法气生鳞芽诱导率可达到100%(每个花苞均可以诱导出气生鳞芽),每个花苞平均可诱导出25颗气生鳞芽,气生鳞芽全部可以诱导成试管鳞茎,试管鳞茎诱导率达100%。由于在整个诱导过程中,没有发生细胞脱分化和再分化,从而降低了遗传突变几率,该发明为大蒜快繁工厂化育苗提供重要的可能性。
申请公布号 CN102792887B 申请公布日期 2013.12.18
申请号 CN201210263069.4 申请日期 2012.07.27
申请人 天津师范大学 发明人 王振英;李转春;彭爱芳;刘晓颖;范宝莉;陈宏
分类号 A01H4/00(2006.01)I 主分类号 A01H4/00(2006.01)I
代理机构 天津市杰盈专利代理有限公司 12207 代理人 朱红星
主权项 一种大蒜试管鳞茎的诱导方法,其特征在于按如下的步骤进行:(1)大蒜花苞采摘及处理田间种植的大蒜甩辫后7‑10天,采摘花苞200个,每个花苞带15‑20cm的假茎,置太阳下晾晒,将花苞平均分成2份,用硫酸纸将带假茎的花苞包好,外套敞口的塑料保鲜袋; (2)低温诱导气生鳞芽将幼嫩大蒜花苞在4‑6℃冰箱中低温诱导30天,待长出气生鳞芽后将外衣和假茎去除备用; (3)复壮气生鳞芽A.以MS培养基为基本培养基,在1L培养基中加a‑萘乙酸0.5mg,激动素2.5mg, 蔗糖30g,琼脂7.5g,定容至1000ml, pH值调为5.8,在121℃、1.1kg/cm2高温高压灭菌20min,待灭菌后的培养基冷却至60℃时,分装到100ml的培养瓶中,每瓶20ml培养基,把口封好以防染菌,备用; B.将低温诱导生出的气生鳞芽解剖,剥离单个气生鳞芽,流水冲洗5‑10min,75%酒精消毒1‑3min,10%安替福民消毒4‑8min,蒸馏水冲洗3‑5次,超净台上接种;在人工气候箱中复壮培养,培养条件:25℃,光照12h/d,光强度2000LX;(4)试管鳞茎的诱导以MS为基本培养基,在1LMS基本培养基中加入60g/L蔗糖,然后再将复壮的气生鳞芽直接接种到此培养基上,培养条件是:25℃,光照12h/d,光强度2000LX,40天后统计试管鳞茎诱导率。
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