发明名称 一种平贝母的促生栽培方法
摘要 本发明公开了一种平贝母的促生栽培方法,主要包括外植体的选择与消毒、材料处理、初代培养、继代培养、小鳞茎的增殖、生根培养和炼苗移栽土壤管理等步骤。在不同的培养阶段的利用不同的激素进行调节,对培养基配方的精确筛选达到试管苗生长旺盛的优良效果,并且结合有效的灭菌技术,达到提高增殖率和减少变异、提高土壤肥力、降低病虫害的目的。并且在继代培养后的小鳞茎的增殖过程中适当更换了培养基,更有利于小鳞茎的快速生长。并且通过鳞片不同部位的比较发现,鳞片繁殖材料最佳选择为内层鳞片的下部。
申请公布号 CN103444528A 申请公布日期 2013.12.18
申请号 CN201310357743.X 申请日期 2013.08.16
申请人 苏州仁成生物科技有限公司 发明人 吴志刚
分类号 A01H4/00(2006.01)I;A01G1/00(2006.01)I 主分类号 A01H4/00(2006.01)I
代理机构 北京瑞思知识产权代理事务所(普通合伙) 11341 代理人 李涛
主权项 一种平贝母的促生栽培方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)外植体的选择与消毒:首先选择当年生长健壮、无霉烂斑点的新鲜平贝母,剪去根及有伤鳞片,流水冲洗30 min后放入清水中浸泡15min,再用50%多菌灵500倍液浸泡20~30 min或者用50%福美双粉500倍液浸泡10~15min,然后将种球鳞片剥下,用紫外灯照射10 min,转入超净工作台,再用75%酒精消毒50 s,无菌水冲洗2~3次,再用6%次氯酸钠溶液消毒10 min,无菌水冲洗2~3次,最后用0.2%的升汞溶液消毒10 min,无菌水冲洗4~5 次;(2)材料处理:首先在超净工作台上,在无菌条件下,切去鳞片上部1/3,然后将中、下部分割开来,将鳞片和鳞茎基部分别切成6‑8mm的小块;(3)初代培养:在无菌的条件下将步骤(2)得到的外植体接种在初代培养基上,该培养基是在在3/4MS常规培养基中添加了0.8mg/L的6‑BA、1.2mg/L的NAA,30‑40mg/L的蔗糖和0.4‑0.8mg/L的ZT;培养温度为24℃,光照时间12 h/d,光照强度2 000 Lx,PH为 6.5,琼脂5 g/L,经过25‑30天形成愈伤组织;(4)继代培养:将初代培养的愈伤组织切下接种在继代培养基上,该培养基是在MS常规培养基中添加了0.5mg/L的6‑BA、0.3mg/L的IBA、0.3mg/L的KT和20mg/L的蔗糖,培养温度为24℃,光照周期13h/d,光强度为2200lux,PH 6.5,经过7‑12天时间分化出绿点后,即开始下一阶段;(5)小鳞茎的增殖:将分化出绿点的愈伤组织继续培养,该培养基是在1/2MS常规培养基中添加了40mg/L的蔗糖、0.3mg/L的KT、0.4mg/LNAA和0.2mg/L的ZT,培养温度为24℃,光照周期13h/d,光强度为2200lux,PH 6.5,经10‑15天培养便可分化出丛生小鳞茎;(6)生根培养:将分化出来的小鳞茎接种于下列诱导培养基中进行生根诱导:1/2 MS培养基、0.3mg/L的KT、1mg/L的活性炭、7‑8g/L的琼脂、0.5mg/L 的NAA,培养温度为24℃,光照周期13h/d,光强度为2200lux,经过8‑12天待小鳞茎长至2.5cm高,根系比较发达时,即开始下一个阶段;(7)炼苗移栽:先将培养瓶移至温室,自然条件下炼苗6d,然后将长出新根的小鳞茎从培养瓶中取出,在阳光下晒1‑2天,在晒的过程中要适当遮光,使光照强度为自然光的60%,温度在18℃左右;(8)土壤管理:调节土壤pH 值为7.0~8.2,将硫磺粉过筛后与5 倍体积细土混匀后施用,除了用硫磺粉调节土壤pH 值外,硫磺粉与草炭混合施用效果则更佳,或者使用松针配合硫磺粉对土壤进行改良,其中松针、原土、粪肥、硫磺粉按照重量份数比2:3:1:2, 或者土壤中施入锯未、草炭、苔藓和硫磺粉进行土壤改良,其中锯未、草炭、苔藓和硫磺粉的重量份数比为1:1:1:2;增加土壤有机质含量:挖宽50 cm、深40 cm 的定植沟,有机质、有机肥、原土按1:1:1的比例进行改土,有机质用酸性草炭,如果用锯末、树皮必须先堆放1月以上,完全腐熟分解后再使用,如用人畜粪尿腐熟或植物秸秆叶子腐烂腐熟后形成的天然肥料,注意不要掺入草木灰、石灰碱性物质,含量达到3%~5%以上, 以增加土壤的通透性;土壤覆盖: 土壤覆盖在苗木定植后即可进行,将覆盖物均匀覆盖在床面,宽1 米、厚5 ~ 10 厘米,以后每年再覆盖2 厘米厚,以保持原有厚度,如果应用未腐烂分解的新锯末,需增施50%的氮肥,腐烂分解好的锯末,氮肥用量应相应地减少,覆盖黑地膜可以防止土壤水分蒸发,控制杂草,提高地温,最好是在有滴灌设施的果园应用,覆盖黑地膜与覆盖有机物相结合效果更佳或者定植前用除草剂杀灭杂草, 定植后全垦园地播撒绿肥白三叶、红三叶等豆科植物, 3月后可完全覆盖园地, 又能增加土壤肥力;当培养基表面成龟裂状后,取出小苗洗净根部附着的培养基,移栽到经消毒上述土壤基质中,温度控制在15℃左右。
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