| 主权项 |
一种湖北贝母的促生栽培方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）外植体的选择与消毒处理：首先选用生长健壮、成熟的新鲜的湖北贝母鳞茎球，剥去鳞茎最外层干皱的鳞片和基部残余老根，先用自来水流水冲洗2‑3次，接着用50％利福平300倍液浸泡20‑30 min后用滤纸吸干水分，然后将鳞茎球一层一层的剥开，然后将剥开的鳞片转入到高压消毒的烧杯中，在超净工作台上先用75 %酒精浸泡杀菌30 s，去除酒精，用无菌水漂洗3‑4 次，再用2%次氯酸钠溶液消毒10min，无菌水冲洗2‑3次，迅速加入3 %双氧水浸泡杀菌8‑10 min ，浸泡过程中经常摇动烧杯，然后倒掉升双氧水液体，用无菌水冲洗4‑5 次后，再用无菌水浸泡备用；（2）材料的处理：将消毒处理好的鳞片用无菌滤纸吸干，在无菌条件下将鳞片按照上、中、下部还有基部，分别切成3‑5mm见方的小块，并且上、中、下部还有基部的材料分别进行下一步培养；（3）愈伤组织诱导及芽分化：在无菌的条件下将步骤（2）得到的外植体接种在愈伤组织诱导培养基中，该培养基是在在MS常规培养基中添加了0.6mg/L的6‑BA、0.8mg/L的GA3，80mg/L的蔗糖、10 g/L琼脂和0.4 mg /L的ZT；培养温度为26℃，光照时间13h/d，光照强度2200 Lx，PH为 6.5，经过10‑15天形成愈伤组织，也有部分直接分化出小细芽；（4）芽的增殖：将步骤（3）中直接分化出来的小细芽接种到3/4MS+琼脂6.0g/L+ NAA 0. 5mg/L + GA3 0.5mg/L+ ZT 0.2mg/L +蔗糖15g/L的培养基上，培养温度为25℃，光照时间12h/d，光照强度2 000 Lx，PH为 6.5，每瓶接种1个芽，8‑12 天后将诱导的丛生小鳞茎，将其中生长健壮、长势良好的小鳞茎转接至生根培养基，其余的小单芽再进行继代培养；（5）愈伤组织的继代培养：将步骤（3）中形成的愈伤组织和接种到1/2MS +6‑BA2.0 mg/L + GA3 0.5mg/L+ KT 0.5mg/L +蔗糖20g/L +琼脂5 g/L的培养基上，培养温度为25℃，光照时间12h/d，光照强度2 000 Lx，PH为 6.5，经过15‑20天长出小鳞茎；（6）生根培养：将经过步骤（4）和步骤（5）分化出来的小鳞茎一个个分别接种于下列诱导培养基中进行生根诱导：3/4MS培养基+琼脂8g/L +KT1.2mg/L +蔗糖20mg/L+活性炭2.0mg/L，培养温度为24℃，光照周期12h/d，光强度为2200lux，PH值为6.5，经过20‑25天待小鳞茎长至2‑3cm高，当根系比较健壮并且长出6‑10个根时，即开始下一个阶段；（7）土壤基质管理：调节土壤pH 值为7.0～8.2，将硫磺粉过筛后与5 倍体积细土混匀后施用，除了用硫磺粉调节土壤pH 值外，硫磺粉与草炭混合施用效果则更佳，或者使用松针配合硫磺粉对土壤进行改良，其中松针、原土、粪肥、硫磺粉按照重量份数比2：3：1：2, 或者土壤中施入锯未、草炭、苔藓和硫磺粉进行土壤改良，其中锯未、草炭、苔藓和硫磺粉的重量份数比为1：1：1：2；增加土壤有机质含量：挖宽50 cm、深40 cm 的定植沟，有机质、有机肥、原土按1:1:1的比例进行改土，有机质用酸性草炭，如果用锯末、树皮必须先堆放1月以上，完全腐熟分解后再使用，如用人畜粪尿腐熟或植物秸秆叶子腐烂腐熟后形成的天然肥料，注意不要掺入草木灰、石灰碱性物质，含量达到3%～5%以上, 以增加土壤的通透性；土壤覆盖: 土壤覆盖在苗木定植后即可进行，将覆盖物均匀覆盖在床面，宽1 米、厚5 ～ 10 厘米，以后每年再覆盖2 厘米厚，以保持原有厚度，如果应用未腐烂分解的新锯末，需增施50%的氮肥，腐烂分解好的锯末，氮肥用量应相应地减少，覆盖黑地膜可以防止土壤水分蒸发，控制杂草，提高地温，最好是在有滴灌设施的果园应用，覆盖黑地膜与覆盖有机物相结合效果更佳或者定植前用除草剂杀灭杂草, 定植后全垦园地播撒绿肥白三叶、红三叶等豆科植物, 3月后可完全覆盖园地, 又能增加土壤肥力；（8）温室炼苗和移栽：为了提高成活率，在移栽之前首先将培养瓶移至温室，温度在20‑25℃时炼苗一周，移栽时先在培养室内揭开培养瓶盖，取出用自来水冲洗去根部的琼脂，避免损伤根，然后用2000倍高锰酸钾浸泡2min，晾干后移栽到步骤（7）中的土壤基质中，为保持较高的湿度，每天喷雾2次，当长出新叶后，可视植株生长情况适当追施氮肥，经过10‑20天当植株长至4‑8cm高时移至大田，并且适当的进行遮荫处理。 |
