高强度长寿命包埋微生物的光化学制备方法

摘要

本发明涉及常温有氧条件下，一种简便的高强度长寿命包埋微生物的光化学制备方法及相应的配方。根据此方法及配方制备的包埋微生物活性高，强度大，在流化反应器中的运行寿命可超过1.5年以上。由于光化学合成方法具有常温下进行，有氧下操作的特点，并且包埋材料具有生物相容性的特点，因此可广泛应用于多种微生物、酶、蛋白质及非微生物种类物质的包埋，并可大规模工业化制备。

主权项

一种包埋微生物载体的光化学制备方法，其特征在于，步骤一，将4.8g‑9g的丙烯酰胺溶解在60ml的去离子水中，加入交联剂，得溶液A；或者将4.8g‑9g的丙烯酰胺溶解在体积为a ml的去离子水中，加入交联剂，得溶液A’；步骤二，用稀酸将步骤一中得到的溶液A调整至pH为1‑5.5，在调整pH后的溶液中加入乙烯基硅氧烷1‑4ml，及四甲氧基硅烷或硅酸四乙酯19‑16ml，搅拌至水解，得溶液B；或者用稀酸将b ml的去离子水调整至pH为1‑5.5，其中a+b=60，在调整pH后的溶液中加入乙烯基硅氧烷1‑4ml，及四甲氧基硅烷或硅酸四乙酯19‑16ml，搅拌至水解，得溶液B’，将溶液A’与B’共混均匀得到混合溶液；步骤三，将PBS缓冲液加入到上一步骤得到的溶液中，调整其pH为中性；然后加入1‑6g的硝化细菌，搅拌均匀；步骤四，在步骤三中得到的混合液中加入的安息香二甲醚溶液，四甲基乙二胺，以及过硫酸钾饱和溶液，迅速搅拌均匀；其中过硫酸钾在包埋体系中的百分比为0.1‑0.6%(m/v)，安息香二甲醚在包埋体系中的百分比为0.1‑1.2%(v/v)，四甲基乙二胺在包埋体系中的百分比为0.7‑5％（m/v）；步骤五，将步骤四中得到的反应液置于辐照光源下辐照2‑6分钟，进行固化；步骤六，根据需要将固化后的包埋微生物载体切割成相应的尺寸及大小。