一种试剂盒以及安氏隐孢子虫的检测方法

摘要

本发明提供的试剂盒，包括LAMP引物、2×反应缓冲液、BstDNA聚合酶、荧光目视检测试剂、超纯水和安氏隐孢子虫阳性模板，所述的LAMP引物包括外引物、内引物及环引物。安氏隐孢子虫的检测方法，其检测步骤包括LAMP引物的设计与合成；LAMP反应体系的建立；LAMP扩增，判断样品中菌种的种类。本发明提供的试剂盒及检测方法，按建立的体系加样即可实时检测安氏隐孢子虫，方便基层快速、准确简便的检测安氏隐孢子虫。

主权项

一种试剂盒，其特征在于：包括LAMP引物、2×反应缓冲液、Bst DNA聚合酶、荧光目视检测试剂、超纯水和预先处理的安氏隐孢子虫阳性模板，所述的LAMP引物包括外引物、内引物及环引物；所述的外引物是F3和B3；所述的内引物是FIP和BIP；所述的环引物是LF和LB；其中引物的序列分别为：F3  CAGGTTTTACATTTTCAGGGAAB3  CATACATTGCTGCCCAGAFIP GCATGTTCCATTCTCCAATACAGTCAGTCTGATACTGCACCTCCBIP GCAAGTAGATACTATATGCCCACCTTGGACATATTTTGTTTGCTGGLF CCAGGAGGACATTCAGGGTTLB GAGGAGGGAAATAGATGTGTCCAG；各组分的份量为：F3                               100μlB3                               100μlFIP                              100μlBIP                              100μlLF                               100μlLB                               100μl2×反应缓冲液                12.5μlBst DNA聚合酶               60μl荧光目视检测试剂            0.1ml超纯水                           1ml安氏隐孢子虫阳性模板      100μl；所述的2×反应缓冲液包括Tris‑HCL、KCL、MgSO4、(NH4)2SO4、Tween20、Betaine和dNTPs。