发明名称 |
一种甘蓝枯萎病菌1号和2号生理小种检测的试剂盒及其检测方法 |
摘要 |
本发明公开了一种甘蓝枯萎病菌1号和2号生理小种检测的试剂盒,包括检测引物、10×PCREasyTaq缓冲液2.0µl、10mM的dNTPs0.5µl、活性酶浓度为5U/ml的Taq聚合酶0.4µl、甘蓝枯萎病菌1号和2号生理小种阳性对照DNA各1µl、重量浓度≥99%的超纯水20µl;还公开了检测方法,包括如下步骤:(1)提取植物组织或土壤DNA;(2)对DNA进行PCR扩增;(3)对扩增产物进行电泳分离,分离后再经溴化乙锭染色于紫外灯下根据扩增产物的大小判定结果,本发明的优点是提供一种准确性高、操作简便、特异性强且灵敏度高的甘蓝枯萎病菌1号和2号生理小种的快速检测与鉴定试剂盒及其方法。 |
申请公布号 |
CN103451298A |
申请公布日期 |
2013.12.18 |
申请号 |
CN201310405495.1 |
申请日期 |
2013.09.09 |
申请人 |
中国农业科学院蔬菜花卉研究所 |
发明人 |
杨宇红;张吉祥;凌键;陈国华;茆振川;谢丙炎 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12Q1/04(2006.01)I;C12R1/77(2006.01)N |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
北京东正专利代理事务所(普通合伙) 11312 |
代理人 |
蔡仲德 |
主权项 |
一种甘蓝枯萎病菌1号和2号生理小种检测的试剂盒,其特征在于,该试剂盒的试剂包括检测引物、10×PCR Easy Taq缓冲液2.0µl、10mM 的dNTPs0.5µl、活性酶浓度为5U/ml的 Taq聚合酶0.4µl、甘蓝枯萎病菌1号和2号生理小种阳性对照DNA各1µl、重量浓度≥99%的超纯水20ul;检测引物包括浓度为1pmol/µl的枯萎病菌通用引物W106R、W106S各1µl,浓度均为10pmol/µl 的甘蓝枯萎病菌1号生理小种的上游引物1#77R、下游引物1#77S各1µl,浓度均为10pmol/µl 的甘蓝枯萎病菌2号生理小种上游引物2#40R、下游引物2#40S各1µl;1#77R的序列5'‑ AAATCCAAGGTGCGAAGA ‑3',1#77S的序列为5'‑ CCAGGCTACACTAATACAACAG ‑3',2#40R的序列为5'‑ CTTTCGCTTCTCCCTTCA ‑3',2#40S的序列为5'‑ AACGCATCGTCTTCTATT ‑3'。 |
地址 |
100081 北京市海淀区中关村南大街12号 |