使用重组微生物制造共聚聚酯的方法

摘要

本发明的目的是提供以糖为原料通过微生物发酵来高效地生产包含3HB和LA的共聚聚酯的方法。本发明提供由3-羟基丁酸和乳酸形成的共聚聚酯的制造方法，其包括下述工序(1)和工序(2)，工序(1)：在含碳源的培养基中培养具有催化向丙酸和/或乳酸转移CoA的反应的蛋白质、催化由2分子乙酰CoA形成乙酰乙酰CoA的反应的蛋白质、催化乙酰乙酰CoA的还原反应的蛋白质、以及包含下述(a)或(b)的氨基酸序列的催化聚羟基脂肪酸酯的合成反应的蛋白质的重组微生物，(a)序列号2所示氨基酸序列的第130位、第325位、第477位和第481位氨基酸的至少1个以上被置换成了其它氨基酸的氨基酸序列，(b)在(a)所定义的蛋白质中，进而除第130位、第325位、第477位和第481位以外的至少1个以上氨基酸缺失或被置换，或者插入了1个以上氨基酸残基的氨基酸序列；工序(2)：从工序(1)的培养物中回收上述共聚聚酯。本发明的制造方法能够以廉价的碳源为原料有效地制造由3HB和LA形成的共聚聚酯，从而能够降低生物降解性塑料的制造成本。

主权项

一种由3‑羟基丁酸和乳酸形成的共聚聚酯的制造方法，其包括下述工序(1)和工序(2)，工序(1)：在含碳源的培养基中培养具有催化向丙酸和/或乳酸转移CoA的反应的蛋白质、催化由2分子乙酰CoA形成乙酰乙酰CoA的反应的蛋白质、催化乙酰乙酰CoA的还原反应的蛋白质、以及催化聚羟基脂肪酸酯的合成反应的蛋白质的重组微生物，所述碳源为碳水化合物、碳原子数4以上的油脂类物质或废糖蜜，所述催化向丙酸和/或乳酸转移CoA的反应的蛋白质由序列号4所示氨基酸序列组成，所述催化由2分子乙酰CoA形成乙酰乙酰CoA的反应的蛋白质由序列号6所示氨基酸序列组成，所述催化乙酰乙酰CoA的还原反应的蛋白质由序列号8所示氨基酸序列组成，所述催化聚羟基脂肪酸酯的合成反应的蛋白质由序列号2所示氨基酸序列的第325位的Ser被置换成了Thr、第481位的Gln被置换成了Lys的氨基酸序列组成；工序(2)：从工序(1)的培养物中回收上述共聚聚酯。